酵母核提取試劑盒適用于從各種酵母中提取完整的具有活性的細胞核。提取過程簡單方便。制備的酵母核純度高，保持天然活性，絕少交叉污染。試劑盒以外自備儀器和試劑耗材：● 離心機 ● 振蕩器 ● 渦旋混勻器 ● 移液器 ● PBS（pH7.4，10mM，1×）...

酵母核提取試劑盒

 

產(chǎn)品編號：HR8198

產(chǎn)品組成：

儲存條件：

2-8℃保存，有效期1年。

產(chǎn)品簡介：

酵母核提取試劑盒適用于從各種酵母中提取完整的具有活性的細胞核。提取過程簡單方便。制備的酵母核純度高，保持天然活性，絕少交叉污染。

試劑盒以外自備儀器和試劑耗材：

● 離心機 ● 振蕩器 ● 渦旋混勻器 ● 移液器 ● PBS（pH7.4，10mM，1×）

酵母核提取試劑盒使用注意事項：

● 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。

● 實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。

● 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。

● 可以根據(jù)自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。

● 離心機轉(zhuǎn)速有相對離心力(RCF,×g)和每分鐘轉(zhuǎn)速(RPM)兩種表示方式,有些離心機設(shè)置有RPM和×g顯示切換,但部分離心機沒有自動切換功能。需要用下面的公式進行換算：

G=r×1.118×10^-5×rpm²(r為有效離心半徑,即從離心機軸心到離心收集管底部中心位置的長度,單位為厘米)例如：轉(zhuǎn)速為3000rpm,有效離心半徑為10cm,則相對離心力(RCF,×g)為=10×1.118×10^-5×3000²=1006.2(×g)。

酵母核提取試劑盒使用方法：

1、酵母培養(yǎng)物，在4℃，1000×g條件下離心5-10分鐘，小心吸取培養(yǎng)基，盡可能吸干，收集酵母沉淀。

2、用PBS洗滌酵母兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。

【注】：

● 在1000×g離心5分鐘。

3、每100μL酵母沉淀物中加入200μL酵母核蛋白提取液A，混勻后，在30℃條件下保溫15分鐘。

4、在1000×g條件下離心5-10分鐘，棄上清，收集酵母沉淀。

5、用500μL PBS洗滌酵母一次，離心收集菌體。

【注】：

● 在1000×g離心5分鐘。

6、酵母沉淀物中加入300-500μL酵母蛋白提取液B，充分混勻。

【注】：

● 根據(jù)酵母細胞量調(diào)整提取液用量，一般加菌體體積的2-5倍均可。

● 按酵母菌體體積每100μL或100mg濕重菌體加入300-500μL提取液。

7、在37℃或室溫條件下輕微振蕩45-60分鐘。

【注】：

● 使用振蕩器/搖床的較低轉(zhuǎn)速，提取液能輕微晃動即可。

● 沒有振蕩條件也可以不振蕩，稍微延長提取液的處理時間，中間每隔幾分鐘用移液器吹打混勻。

8、在1000×g條件下離心5-10分鐘，收集沉淀，棄上清。

9、用500μL PBS洗滌沉淀。離心收集沉淀。

【注】：

● 在1000×g，離心10分鐘。

10、沉淀中加入500μL酵母核提取液C，高速渦旋15 秒混勻，然后在振蕩器上振蕩15-30分鐘。

【注】：

● 使用振蕩器/搖床的較低轉(zhuǎn)速，提取液能輕微晃動即可。

● 沒有振蕩條件也可以不振蕩，稍微延長提取液的處理時間，中間每隔幾分鐘用移液器吹打混勻。

11、再次高速渦旋振蕩5秒，然后在4℃，1000×g條件下離心10分鐘，棄上清，沉淀即為酵母細胞核。

12、用適量試劑D重懸酵母核，置4℃保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灐?

【注】：

● 也可根據(jù)下游實驗需要用其他緩沖液保存。

● 需要再次回收酵母核時，在1000×g，離心10分鐘收集沉淀即可。

如果您覺得“HR8198 酵母核提取試劑盒”描述資料不夠齊全，請聯(lián)系我們獲取詳細資料。(聯(lián)系時請告訴我從給覽網(wǎng)看到的，我們將給您最大優(yōu)惠！)
本頁鏈接：http://www.okbaiwei.com/com_bjbiolab/sell/itemid-9455461.html
已經(jīng)有856位訪客查看了本頁.