植物組蛋白提取試劑盒提供了一種簡單而應用廣泛的方法以及相應的試劑提取組蛋白。適用于從各種植物細胞、組織樣本中提取組蛋白。提取過程簡單方便。組蛋白提取產物的產量大約0.2-0.4mg每107個細胞或100mg組織，不同的細胞和組織中，產量差異很大。...

植物組蛋白提取試劑盒

 

產品編號：HR0035

產品組成：

儲存條件：

蛋白酶抑制劑-20℃保存，蛋白提取液、試劑C 2-8℃保存；有效期1年。

【注】：

● 蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃保存。開蓋使用后-20℃保存。

● 蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。

植物組蛋白提取試劑盒簡介： 

植物組蛋白提取試劑盒提供了一種簡單而應用廣泛的方法以及相應的試劑提取組蛋白。適用于從各種植物細胞、組織樣本中提取組蛋白。提取過程簡單方便。組蛋白提取產物的產量大約0.2-0.4mg每10⁷個細胞或100mg組織，不同的細胞和組織中，產量差異很大。

提取的蛋白可用于WB、蛋白質電泳、組蛋白修飾實驗比如乙酰化、甲基化、sumoylation等下游蛋白研究。

產品特點：

1、使用方便，不需經過反復凍融、超聲破碎等前處理。

2、含蛋白穩定劑，提取的蛋白穩定。

3、紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。

4、蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含7種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

試劑盒以外自備試劑和儀器：

● 移液器 ● 離心機 ● 振蕩器 ● 渦旋混勻器 ● 勻漿機/勻漿器 ● PBS ● 蛋白定量試劑盒

注意事項：

● 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。

● 實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。

● 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。

● 可以根據自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。

使用方法：

植物組織組蛋白提取：

1、提取液制備：

每500μL 蛋白提取液A 中加入2μL 蛋白酶抑制劑混合物混勻后置冰上備用。

【注】：

● 根據需要處理的樣品數量準備蛋白提取液，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。

● 加過蛋白酶抑制劑的提取液一周內未使用完，再次使用前需要再次加入蛋白酶抑制劑。

2、取100mg植物組織樣本用剪刀盡可能剪碎，加入蛋白提取液A，用組織勻漿器勻漿至無明顯肉眼可見固體。

3、將組織勻漿吸入一預冷干凈離心管中，靜置10分鐘，在4℃，16000×g條件離心15分鐘，棄上清。

4、沉淀中加入100μL組蛋白提取液B。

5、用200μL槍頭反復吹打混勻或充分渦旋振蕩混勻，置4℃冰箱過夜存放。

6、16000×g條件下離心10分鐘，收集上清。

7、在上清中加入10-20μL試劑C充分混勻。

8、加入上樣緩沖液混勻后煮沸，分裝于-80℃冰箱保存備用或直接用于下游實驗。

【注】：

● 加入上樣緩沖液后應為上樣緩沖液的藍色，如果顏色變黃，可以再加入試劑C混勻，每次加入5μL，至恢復藍色為止。

植物組蛋白提取試劑盒植物細胞組蛋白提取：

1、提取液制備：

每500μL蛋白提取液A中加入2μL蛋白酶抑制劑混合物混勻后置冰上備用。

2、收集5-10×10⁶個細胞，在4℃，1000×g條件下離心5-10分鐘，吸干上清，收集細胞。

3、用冷PBS洗滌細胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。

4、每5-10×10⁶個細胞中加入500μL蛋白提取液A，混勻后，在4℃條件下輕輕振蕩15分鐘。

5、在4℃，16000×g條件下離心15分鐘，棄上清。

6、沉淀中加入100μL組蛋白提取液B。

7、用200μL槍頭反復吹打混勻或充分渦旋振蕩混勻。

8、置4℃冰箱過夜存放。

9、16000×g條件下離心10分鐘，收集上清。

10、在上清中加入10-20μL試劑C充分混勻。

11、加入上樣緩沖液混勻后煮沸，分裝于-80℃冰箱保存備用或直接用于下游實驗。

【注】：

● 加入上樣緩沖液后應為上樣緩沖液的藍色，如果顏色變黃，可以再加入試劑C混勻，每次加入5μL，至恢復藍色為止。

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