YT415 TE Buffer

產品簡介
TE Buffer由北京百奧萊博供貨并提供相關技術服務支持,本品用于生化實驗研究等領域,TE Buffer是我司眾多優質克隆與表達之一,質量堪比同類進口產品,價格非常優惠,目前正熱烈促銷中,恭候您的咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括TE Buffer在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:TE Buffer
英文名稱:Tris-EDTA buffer
產品貨號:YT415
產品規格:100ml
本品為10mM Tris,1mM EDTA,pH8.0的buffer,常用分子生物學試劑,用于DNA的溶解等。
儲存條件:室溫。
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貨號 | 名稱 | 規格 |
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名稱:大腸桿菌DH5α化學感受態細胞
貨號:BTN81024
規格:0.1mL*10
本產品是采用大腸桿菌DH5α菌株經特殊工藝處理得到的感受態細胞,可用于DNA的熱擊轉化。DH5α是一種常用于質粒克隆的菌株,其φ80lacZΔM15基因產物可與載體編碼的β-半乳糖苷酶氨基端實現α互補,可用于藍白斑篩選。recA1和endA1的突變有利于克隆DNA的穩定和高純度質粒DNA的提取。使用pUC19質粒檢測,轉化效率不低于107,適用于的質粒DNA克隆并能保證高拷貝質粒的穩定復制。
本菌種來源于Hoffman-Berling 1100菌種。
基因型 | 表現型 |
deo R | 組成型合成脫氧核糖 |
end A1 | 核酸內切酶I缺失 |
gyr A96 | 具有萘啶酮酸抗性 |
hsd R17 | 限制性酶EcoK缺失 |
△(lac)U169 | lac基因缺失 |
rec A1 | DNA重組活性降低 |
Rel A1 | 允許在無蛋白質合成時有RNA合成 |
sup E44 | 抑制琥珀突變突變,為某些噬菌體必需 |
thi-1 | 不能自身合成硫氨 |
φ80(lac ZΔM15) | 提供α-互補所需的ω片斷 |
儲存條件:干冰運輸、-80℃保存,有效期半年。
使用方法:
1. 取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100μl,可以根據實際情況分裝使用。
以下實驗以50μL感受態細胞為例。
2. 待感受態細胞融化后,向感受態細胞懸液中加入目的DNA(根據實際情況加入適量的DNA,通常100μl感受態細胞能夠被1ng超螺旋質粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3. 42℃熱擊90秒,迅速將離心管轉移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘。
4. 每個離心管中加入800μl無菌的SOC或LB培養基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,200rpm(小于225rpm)振蕩培養45分鐘使菌體復蘇。
5. 根據實驗需求,取適量已轉化的感受態細胞,加到含相應抗生素的SOC或LB固體瓊脂培養基上,用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養,37℃培養12-16小時。
注意事項:
1、涂布用量可根據具體實驗調整。若轉化的DNA總量較多,可取少量轉化產物涂布平板;若轉化的DNA總量較少,可取200-300μl轉化產物涂布平板。若預計的克隆數較少,可通過離心(4,000rpm ,2分鐘)后吸除部分培養液,懸浮菌體后將其涂布于平板中。
2、新制備的固體培養基不易涂干,可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的轉化菌落數過少,可以將剩下的菌液再涂布新培養基進行培養。
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