裂殖酵母化學感受態(tài)細胞制備試劑盒由專業(yè)試劑供應商北京百奧萊博提供，用于生化實驗研究等領域，裂殖酵母化學感受態(tài)細胞制備試劑盒是我司眾多優(yōu)質克隆與表達之一，質量堪比同類進口產(chǎn)品，價格非常優(yōu)惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購。...

特別提示：包括裂殖酵母化學感受態(tài)細胞制備試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：裂殖酵母化學感受態(tài)細胞制備試劑盒
英文名稱：S.pombe Chemical Competent Cell Preparation Kit
產(chǎn)品貨號：BTN100103B
產(chǎn)品規(guī)格：20次

本裂殖酵母化學感受態(tài)細胞制備試劑是一種通過化學處理，快速制備裂殖酵母化學感受態(tài)細胞，用于長期凍存以備后續(xù)轉化的產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點：
1.一次制備，-80℃保存，多次使用，免去每次轉化都要制備裂殖酵母感受態(tài)細胞。
2. 操作簡單，單溶液制備，除酵母培養(yǎng)的時間外，整個操作只需要30分鐘。
3. 主要用于裂殖酵母S. pombe ，其他多種實驗用酵母菌株zuì好選用酵母化學感受態(tài)細胞制備試劑(BTN81109)。
4. 受體酵母可以不含質粒，也可用于攜帶有選擇性質粒的酵母(如雙雜交體系中的酵母)。
5. zuì高轉化效率可達到0.2-1×105個轉化子/μg質粒DNA。
6. 得到的感受態(tài)細胞可以用各種線性或環(huán)狀酵母穿梭質粒DNA進行轉化，例如YIp，YRp，YCp，YEp和YAC等。
7.可以用于酵母雙雜交、定點突變、基因破壞、等位突變基因修復等實驗。
8. 本產(chǎn)品可以制備20只裂殖酵母感受態(tài)細胞(需要100mL裂殖酵母培養(yǎng)液)，其中A型只用于制備感受態(tài)細胞，B型還帶轉化液。

試劑盒組成：

組分	BTN100103A	BTN100103B
溶液A	1ml	1ml
裂殖酵母轉化液	-	一套(20次)
使用說明書	1份	1份

儲存條件：常溫運輸及保存，有效期一年。

使用效果：
將一個酵母菌落接種到SLD培養(yǎng)基中，30℃搖晃培養(yǎng)直到OD600達到0.6-1.0，冰浴15分鐘后離心棄上清，用自備無菌水洗滌三次，然后用相當于菌液zuì初體積百分之一的溶液A重懸，按每管50μl分裝，放-80℃保存。

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名稱：平末端DNA加T試劑盒
貨號：BTN60106
規(guī)格：50次
本產(chǎn)品利用Taq DNA polymerase的不依賴于模板的末端轉移酶活性，在只有dTTP存在的情況下，在平末端的DNA片段加上一個dT尾巴，主要用于制備T載體。其流程圖如下：


產(chǎn)品特點：
1. 簡單，2X Tailing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要單獨準備。
2.適用于任何平末端的DNA片段，包括Pfu DNA成本polymerase等酶合成的DNA片段。
3. 加T后的載體可以作為T載體使用。

產(chǎn)品組成：

成分	規(guī)格
Taq DNA olymerase(5U/μL)	50μl
2×dT Tailing Buffer	1.25ml
說明書	1份

儲存條件：低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：反應前純化處理：
平末端DNA片段或平末端質粒DNA可以采取膠回收和酚/氯fǎng抽提法等常規(guī)方法純化，zuì后溶解在水或TE中，終濃度以0.1μg/μL為宜。必須注意的是，用Vent，Deep Vent，Pfu，Pwo等具有3到5外切活性的DNA聚合酶擴增得到的DNA片段，必須經(jīng)過徹底的去除殘留的酶的處理過程(如酚/氯fǎng抽提或Proteinase K處理)，否則它們將在加T反應時，切除掉加上的T尾巴，干擾反應。
二：加T反應
在干凈的0.5mL或1.5mL離心管中，分別加入下列成分：

回收的DNA片段	0.2-2μg
2×dT Tailing Buffer	25μL
Taq DNA polymerase(5U/μL)	1μL
補水到	50μL
72℃保溫2小時

三：反應后處理
加T反應后，Taq DNA polymerase將與DNA末端緊密結合，所以必須酚/氯fǎng抽提去除。如果使用Proteinase K處理后再用酚/氯fǎng抽提效果會更好。得到的DNA溶于適量水和TE中后即可用于后續(xù)連接反應。

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