酵母基因組DNA提取試劑盒由專業試劑供應商北京百奧萊博提供，用于科學研究，我公司的酵母基因組DNA提取試劑盒品質上佳，經過多年的開發生產，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...

特別提示：包括酵母基因組DNA提取試劑盒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：酵母基因組DNA提取試劑盒
英文名稱：Yeast Genomic DNA Extraction Kit
產品貨號：WE0181
產品規格：50次

  本試劑盒適用于從酵母樣品中提取高純度的總DNA，本品無需使用苯酚、氯fǎng等有機溶劑抽提，可獲得zuì大為50 kb的DNA，同時對100 bp的DNA片段也能有效的回收。本試劑盒采用優化的緩沖液體系使裂解液中的DNA結合在硅膠膜上，而其他污染物可流過膜，使用低鹽緩沖液或水洗脫，即可獲得高純度的DNA。提取的DNA可直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文庫構建、Southern Blot、分子標記等下游實驗。

試劑盒組成：

組份	50次
Buffer GTL	15ml
Buffer GL	15ml
Buffer GW1(濃縮液)	13ml
Buffer GW2(濃縮液)	15ml
Buffer GE	15ml
蛋白酶K	25 mg
蛋白酶K 儲存液	1.25ml
Lyticase Working Buffer	30ml
Lyticase	300μl
Glass Beads	2g
吸附柱DM及收集管	50套

保存條件：Lyticase -20℃，其他組分室溫(15～30℃)。

自備試劑：無水乙醇，β-巰基乙醇。

產品特點
1、適用于從酵母樣品中分離純化高純度總DNA。
2、無需有機溶劑提取以及乙醇沉淀，徹底去除污染物及下游反應抑制物，快速提取高品質DNA。
3、Lyticase酶與玻璃珠共同作用，有效破除酵母細胞壁。

實驗前準備及重要注意事項：
1、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 儲存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿長時間室溫放置，避免反復凍融，以免影響其活性。
2、樣品應避免反復凍融，否則會導致提取的DNA片段較小且提取量下降。對于有些細胞壁較厚以及在培養階段會產生大量代謝物的酵母，建議在生長早期收集樣品。
3、Lyticase Working Buffer在使用前請加入β-巰基乙醇，使其終濃度為0.1%。
4、次使用前應按照試劑瓶標簽說明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入無水乙醇。
5、使用前請檢查Buffer GTL和Buffer GL是否出現結晶或者沉淀，如有結晶或者沉淀，請將Buffer GTL和Buffer GL于65℃水浴重新溶解。
6、如果下游實驗對RNA污染比較敏感，可以在加入Buffer GL前加入4μl DNase-Free的RNase A(100 mg/ml)，RNase A本試劑盒并未提供，如需要可單獨向本公司訂購，貨號：WE0225S。

操作步驟：
1、取1-5ml酵母培養物(zuì多不超過5×107個細胞，一般對于釀酒酵母OD600=1.0時，相當于1-2×107細胞/ml)，12000rpm(～13400×g)離心1分鐘，收集菌體沉淀，盡量吸棄上清。
注意：菌液較多時，可以通過幾次離心將菌體沉淀收集到一個離心管中。
2、酵母細胞壁的去除：向菌體中加入600μl Lyticase Working Buffer(使用前檢查是否加入β-巰基乙醇，使其終濃度為0.1%)，并加入5μl Lyticase，充分混勻。30℃處理30分鐘。4000rpm(~1,500×g)離心10分鐘，棄上清，收集沉淀。
注意：以上為5×107酵母細胞Lyticase用量，根據酵母的菌株和酵母細胞數量的不同，所用的Lyticase的濃度和孵育時間應該進行適當調整。
3、向沉淀中加入200μl Buffer GTL，加入40 mg玻璃珠(Glass Beads)，渦旋5分鐘。
4、加入20μl 蛋白酶K 混勻。55℃振蕩水浴至細胞完全裂解。若無振蕩水浴箱，溫育期間每20-30分鐘顛倒混勻一次。(一般不超過1小時細胞即可完全裂解)。
注意：如需去除RNA，在上述步驟完成后加入4μl 100 mg/ml 的RNase A溶液(貨號：WE0225S)，震蕩混勻，室溫放置5-10分鐘。
5、12000rpm離心5分鐘，小心吸取上清至新離心管中。
6、加入200μl Buffer GL，充分混勻。70℃孵育10分鐘，其間顛倒混勻數次，12000rpm離心5分鐘，將上清移到一個新的離心管中。
注意：若孵育后溶液未變清亮，說明細胞裂解不徹底，可能導致提取DNA量少和提取的DNA不純。
7、加入200μl無水乙醇，充分顛倒混勻，此時可能會出現絮狀沉淀。短暫離心，使管壁和管蓋上的液體集中到管底。
8、將步驟7所得溶液和沉淀全部加入到已裝入收集管的吸附柱DM中，若一次不能加完溶液，可分多次轉入。12000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
9、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
10、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
注意：如需進一步提高DNA純度，可重復步驟10。
11、12000rpm離心2分鐘，倒掉收集管中廢液。將吸附柱置于室溫數分鐘以徹底晾干。
12、將吸附柱置于一個新的離心管(自備)中，向吸附柱的中間部位懸空加入50-200μl Buffer GE或滅菌水，室溫放置2-5分鐘，12000rpm離心1分鐘，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游實驗對pH值或EDTA敏感，可以用滅菌水洗脫。洗脫液的pH值對洗脫效率有很大影響，若用水做洗脫液應保證其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH將水的pH值調到此范圍)，pH值低于7.0時洗脫效率不高。
2)離心之前室溫孵育5分鐘可以增加產量。
3)用另外的50-200μl Buffer GE或滅菌水再次洗脫可以增加產量。
4)如果要提高DNA的終濃度，可以將步驟10所得的DNA洗脫液重新加至吸附膜上，重復步驟10；若洗脫體積小于200μl，可以增加DNA的終濃度，但可能會減少總產量。如果DNA的量小于1μg，推薦用50μl Buffer GE或滅菌水洗脫。
5)因為保存在水中的DNA會受到酸性水解作用的影響，如需長期保存，推薦用Buffer GE洗脫并于-20℃保存。

儲存條件：室溫(15～30℃)。

根據您的關注的酵母基因組DNA提取試劑盒，酵母基因組DNA提取試劑盒，WE0181，百奧萊博，，，您可能還對以下產品有需求：



名稱：柱式昆蟲DNA提取試劑盒
貨號：BTN81101
規格：50次
本試劑盒是專門用于從昆蟲、節肢動物、蛔蟲、扁形蟲和一些富含多糖的動物組織中提取基因組DNA的試劑盒。其原理是基于去垢劑在適當的離子強度條件下，特異地跟基因組DNA結合形成沉淀，然后在用硅膠膜離心吸附法進行進一步純化得到DNA。

產品特點：
1.適用于用常規方法難以提取的、各種富含多糖的動物，包括昆蟲、節肢動物、蛔蟲、扁形蟲等。
2. 除新鮮樣品外，還適合于各種保存狀態的樣品，包括冷凍的樣品、用乙醇保存的樣品和福爾馬林保存的樣品。
3. 提取到的基因組DNA完整性，長度一般在20-50 Kb。
4. DNA純凈，OD260/280一般都在1.8左右，可直接用于PCR、酶切、雜交等。
5. 操作簡單，整個過程約30分鐘。
6. 安全，本試劑盒對人體，無腐蝕性和刺激性氣味。

試劑盒組成：

成分	規格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
溶液C	50ml
離心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脫液2.0	10ml
說明書	1份

儲存條件：常溫運輸及保存，有效期一年。

使用方法：
1. 稱取0.1-0.3 g昆蟲樣品轉移到塑料研缽中，液氮研磨成粉后轉移到一個干凈的1.5mL塑料離心管中。
 注意：zuì好避免使用含二氧化硅的玻璃研缽，因為DNA會吸附在表面，影響得率。
2.在離心管中加入1mL 65℃預熱的溶液A并用移液槍頭充分吹打混勻(如果溶液A有沉淀，需先在65℃加熱溶解后搖勻再使用)。
3. 65℃保溫5-30分鐘，其間zuì好吹打混勻2-3次。
4. 12000～15000g室溫離心3分鐘。
5. 將不超過0.75mL的上清轉移到新離心管中。有時候上清液中還會有少量細小懸浮物，但對后續操作沒有影響，不必進行特殊處理。
6.在上清液中加入等體積的溶液B，上下顛倒30秒充分混勻，溶液將呈白色混濁狀。
7. 將其置于冰浴中放置5-10分鐘。
8. 12000～15000g室溫離心3分鐘，轉移上清到新的1.5mL塑料離心管中。
9. 加入0.2mL的氯fǎng(自備)，震蕩器上充分振蕩30秒混勻。
10. 12000～15000g室溫離心3分鐘，兩相交界面將有白色膜狀物，小心轉移上清到新1.5-5mL塑料離心管中。注意：由于下一步要加1.5倍體積的溶液C，所以新的離心管的體積要足夠大。
11. 加入1.5倍體積的溶液C，上下顛倒30秒混勻，然后分多次的將混合液轉移到離心吸附柱中。
12. 每次轉移0.7-0.8mL混合液后，室溫放置5-10分鐘。
13. 12000～15000g室溫1分鐘，棄穿透液。
14. 對需要多次上柱的樣品，可以在此將剩余的樣品加到離心吸附柱式中，重復第12-14步的操作。
15. 將0.7mL通用洗柱液加入離心柱，室溫離心1分鐘，棄穿透液。
16.在離心吸附柱中加入0.3mL的通用洗柱液，12000～15000g離心半分鐘(此步為第二次洗滌)。
17. 空甩1分鐘去除殘留液體。
18. 將離心柱放置在一新的1.5mL塑料離心管中，加入30-100μl DNA洗脫液2.0。
19.室溫放置5分鐘后離心1分鐘，管底即為昆蟲DNA溶液，可立即使用，也可長期保存在－20℃。
20.可以重復上步一次，以洗脫更多的DNA。

關注酵母基因組DNA提取試劑盒，酵母基因組DNA提取試劑盒，WE0181，百奧萊博，，的同時，為您推薦更多您可能感興趣的產品：


BTN111201 痰液DNA提取試劑盒 50次
BTN70701 柱式病毒DNA提取試劑盒 50次
ALH128 大量組織細胞DNA提取試劑盒 20次|50次
ALH178 唾液DNA收集提取試劑盒 10次|50次
RFT030 瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒 100次|200次
RFT035 動物組織細胞DNA提取試劑盒 50次|100次
QN0901 革蘭氏陽性菌質粒大量提取試劑盒 10T
ML012 植物基因組DNA提取試劑盒（磁珠法） 64T

如果您覺得“WE0181 酵母基因組DNA提取試劑盒”描述資料不夠齊全，請聯系我們獲取詳細資料。(聯系時請告訴我從給覽網看到的，我們將給您最大優惠！)
本頁鏈接：http://www.okbaiwei.com/com_bjbiolab01/sell/itemid-8516809.html
已經有1021位訪客查看了本頁.