北京百奧萊博供應(yīng)的XL1-Blue化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞用于科研目的，我公司的XL1-Blue化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞品質(zhì)上佳，經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn)，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...

特別提示：包括XL1-Blue化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：XL1-Blue化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
英文名稱：XL1-Blue Chemically Competent Cell
產(chǎn)品貨號(hào)：MQ0008
產(chǎn)品規(guī)格：10×100μl/50×100μl

XL1-Blue菌株能保證高拷貝質(zhì)粒穩(wěn)定復(fù)制，recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。
hsdR17突變導(dǎo)致EcoK核酸內(nèi)切酶系統(tǒng)缺失，增強(qiáng)了外源DNA的穩(wěn)定性和提取質(zhì)量。lacIqZΔM15的存在使XL2-Blue菌株可用于藍(lán)、白斑篩選。此菌株具有四環(huán)素抗性。
XL1-Blue感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>1×109cfu/μg。
保存條件：-80℃
基因型：
recA1 endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 supE44(rk-,mk+)，relA1 lac [F" proAB lacIqZ?M15：Tn10(tetr)]
操作說明：
1.XL1-Blue感受態(tài)細(xì)胞放置冰中融化(或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時(shí)迅速插入冰中)，加入目的DNA(質(zhì)粒或連接產(chǎn)物)并用手撥打EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。
2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基(2YT或LB)，混勻后37℃，200rpm復(fù)蘇60分鐘。
4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
注意事項(xiàng)：
1.感受態(tài)細(xì)胞zuì好在冰上融化。
2.混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少zuì終用于涂板的菌量。

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名稱：土霉素鹽酸鹽溶液
貨號(hào)：BTN120696
規(guī)格：10mL
本產(chǎn)品為溶于水:乙醇(2:1)混合液濃度為100mg/mL的土霉素鹽酸鹽溶液，參考濃度為50mg/mL。土霉素?zé)熕猁}(鹽酸土霉素；氧四環(huán)素鹽酸鹽；地霉素；Oxytetracycline hydrochloride)，分子式：C22H24N2O9·HCl，分子量是：496.89，CAS號(hào)：2058-46-0，土霉素鹽酸鹽能阻止氨基酰-tRNA與30S亞單位結(jié)合，從而抑制蛋白合成。抗菌譜：革蘭氏陰性和陽性細(xì)菌。

儲(chǔ)存條件：低溫運(yùn)輸，-20℃避光保存，有效期6個(gè)月。

名稱：N端YFP標(biāo)簽融合蛋白質(zhì)粒(黃色熒光蛋白)
貨號(hào)：YT478
規(guī)格：1μg
本質(zhì)粒是哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)質(zhì)粒，用于表達(dá)N端含YFP(Yellow Fluorescent Protein, 黃色熒光蛋白)標(biāo)簽的融合蛋白。該質(zhì)粒含有CMV啟動(dòng)子，可以啟動(dòng)目的蛋白在細(xì)胞中的表達(dá)。在多克隆位點(diǎn)的前面有一個(gè)YFP的完整編碼序列，因此在多克隆位點(diǎn)根據(jù)閱讀框插入目的基因就可以表達(dá)N端含有YFP標(biāo)簽的融合蛋白。利用YFP的熒光特性可以比較容易地觀察融合蛋白的表達(dá)水平和細(xì)胞內(nèi)定位，也可以利用YFP抗體來檢測(cè)或免疫沉淀融合蛋白。YFP與GFP高度相似，可以嘗試用GFP抗體檢測(cè)YFP。該質(zhì)粒為卡那霉素抗性。轉(zhuǎn)染細(xì)胞后，可以使用G418篩選穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株。

本質(zhì)粒質(zhì)粒的主要信息如下：

Feature Nucleotide	Position
CMV promoter	1-602
T3 promoter and T3 primer binding site	620-639
YFP	677-1393
Multiple cloning site	1394-1483
T7 promoter and T7 primer binding site	1503-1524
SV40 polyA signal	1536-1919
f1 origin of ss-DNA replication	2057-2363
bla promoter	2388-2512
SV40 promoter	2532-2870
Neomycin/kanamycin resistance ORF	2905-3696
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal	3697-4155
pUC origin	4284-4951

本質(zhì)粒(5003bp)的圖譜如下：


使用說明：
1. 次使用時(shí)請(qǐng)先取少量本質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，進(jìn)行質(zhì)粒小量、中量或大量抽提后再用于后續(xù)用途。抽提獲得的質(zhì)粒可以通過酶切電泳進(jìn)行鑒定，或通過測(cè)序進(jìn)行鑒定。
2. 本質(zhì)粒在其多克隆位點(diǎn)適當(dāng)酶切后可以插入待表達(dá)的目的基因，構(gòu)建的質(zhì)粒可以用常規(guī)方法轉(zhuǎn)染細(xì)胞。

儲(chǔ)存條件：-20℃。

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