雞毒支原體PCR檢測試劑盒由北京百奧萊博供貨并提供相關技術服務支持，本品用于生化實驗研究等領域，雞毒支原體PCR檢測試劑盒是我司眾多優質動物疫病PCR檢測試劑盒之一，質量堪比同類進口產品，價格非常優惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購。...

特別提示：包括雞毒支原體PCR檢測試劑盒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：雞毒支原體PCR檢測試劑盒
英文名稱：MycopvpAma gallisepticum PCR Kit
產品貨號：BTN11-1490
產品規格：50次

本產品根據MG特異性黏附蛋白編碼基因pvpA序列，設計了一對特異性檢測引物，基于PCR方法對雞毒支原體進行快速檢測。雞毒支原體（MycopvpAma gallisepticum，MG）是引起雞慢性呼吸道病的主要病原，引起雞呼吸道黏膜卡他性炎癥及其他雞傳染性支氣管炎病毒感染等并發癥，導致肉雞胴體品質下降，雞群死亡率增高，給養雞業造成嚴重的經濟損失。

產品特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供樣品DNA模板，操作簡單。
2. 本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

產品組成：

組分	編號	規格(50T)
即用型PCR Mix 3.0	BTN90805	1.5mL
pvpA專一性引物對	yw13931394	100uL
pvpA陽性對照	yw13951396	50uL
超純水	BTN00935	1mL

保存條件：-20℃保存，有效期一年。

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名稱：禽流感病毒(AIV-M)通用型單重熒光PCR檢測試劑盒（定性/定量）
貨號：SYA320
規格：48次/盒|96次/盒
一、簡介：
禽流感病毒實時熒光qRT-PCR檢測試劑是按照美國農業部(USDA)的檢測標準和我國《禽流感病毒通用熒光RT-PCR檢測方法》(GB/T 19438.1-2004)而制備的商業化檢測試劑盒。本試劑盒為中的探針報告基團為6-FAM，淬滅基團為MGB。本方法可定性檢測所有亞型禽流感病毒。

二、用途：
本試劑盒適用于檢測各種禽類喉咽棉拭子、泄殖腔棉拭子、各種組織樣品、尿囊液及細胞培養液等?？捎糜谇萘鞲胁《靖腥镜妮o助診斷、監測及流行病學調查，其檢測結果僅供參考。

三、試劑盒組成：(48T)
組份 數量 規格
熒光qRT-PCR反應液(AIV-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
無核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
陰性對照(NTC) 1 管 50μL/管
陽性對照(AIV-PTC) 1 管 50μL/管

四、儲存條件及有效期：
本試劑盒于-18℃以下保存，有效期為6個月。

五、熒光PCR儀器適用范圍：
ABI系列，Roche系列等熒光定量PCR檢測儀等。

六、樣品的采集與RNA提取
6.1 樣品的采集
按照標準《高致病性禽流感診斷技術》(GB/T 18936-2003 )和《禽流感病毒通用熒光RT-PCR檢測方法》(GB/T 19438.1-2004 )進行樣品的采集。
6.2 樣品RNA提取
可按常規方法提取，也可采用商品化試劑盒提取病毒RNA。
（1） 取滅菌的1.5 mL Eppendorf離心管，做好標識。
（2） 每管加入600 μL裂解液，分別加入被檢樣本200 μL，再加入200 μL氯fǎng，混勻器上振蕩混勻5 s，于4℃ 12000 r 離心15 min。
（3） 取無RNA酶的1.5 mL Eppendorf離心管，加入-20℃預冷400μL異丙醇，吸取步驟(2)各管中的上清液轉移至相應的管中，避免吸出中間層，顛倒混勻。
（4） 于4℃ 12000 r離心15 min，棄上清，倒置于吸水紙上，沾干液體；加入600μL 75％預冷乙醇，洗滌。
（5） 于4℃ 12000 r離心10 min，棄上清，倒置于吸水紙上，沾干液體。
（6） 10000 r離心10 s，用微量加樣器將其吸干，室溫干燥5 min～10 min。
（7） 加入10μL 無核酸降解酶的水，溶解管底的RNA，5000 r離心5 s，冰上保存備用。若需長期保存須放置-70℃ 冰箱。
 注：陽性對照和陰性對照為已經抽提好的核酸(無需提取)，直接取5μL加入到反應體系中即可。由于陽性對照濃度較高，建議zuì后在樣品制備區域加入陽性對照。

七、檢測步驟：
7.1 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光qRT-PCR反應液(AIV-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14μL N×14μL
酶混合物 1 μL N×1 μL
總量 15 μL N×15μL
計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000r離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(AIV-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 real time RT-PCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
反轉錄(Reverse Transcription) 1循環 45℃ for 5 min
預變性 1循環 94℃ for 30 sec
PCR擴增(PCR amplification ) 40循環 94℃ for 5 sec
60℃ for 30 sec
在60℃延伸時收集熒光信號 。報告基團：設置為FAM。

八、結果分析：
8.1 結果分析條件設定
直接讀取檢測結果?；€和閾值設定原則根據儀器噪聲情況進行調整，以閾值線剛好超過正常陰性樣品擴增曲線的zuì高點為準。
8.2 試驗成立判定
（1） 陰性對照(NTC)：不應產生任何的擴增曲線。
（2） 陽性對照(AIV -PTC)：均產生擴增曲線。
（3） 以上條件應同時滿足 ，否則，此次試驗視為無效。
8.3 結果判定
（1） 在試驗成立的條件下，Ct值≤35的樣本為陽性，表明AIV核酸陽性。
（2） Ct值顯示為無的樣本為陰性樣本，表明AIV核酸陰性。
（3） 如果35＜Ct值≤40，判為可疑樣品。對于可疑樣品，先看擴增曲線。如果擴增曲線為對數擴增曲線，則為可疑陽性，否則判為陰性。
（4） 對于可疑陽性樣品，重新抽提核酸，再次進行AIV qRT-PCR檢測。如果重復擴增曲線為對數擴增曲線，判為樣本陽性，表明AIV核酸陽性；否則判為樣本陰性。

九、注意事項：
（1） 初次使用前請仔細閱讀說明書。并嚴格按照說明書步驟操作。
（2） 所有使用的離心管zuì好高壓滅菌，而且必須不含RNA酶。
（3） PCR操作應嚴格按照要求分區(試劑配制區、標本處理區、PCR擴增區等)，防止實驗室污染。
（4） 樣本提取、試劑配置、加樣需在不同區的超凈工作臺進行，以免污染。
（5） 試劑盒里所有物品應視為污染物對待，并按照衛生部《微生物生物醫學實驗室生物安全通則》進行處理。


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