北京百奧萊博供應(yīng)的大腸桿菌0化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞用于生化實(shí)驗(yàn)研究等領(lǐng)域，大腸桿菌0化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞是我司眾多優(yōu)質(zhì)克隆與表達(dá)之一，質(zhì)量堪比同類進(jìn)口產(chǎn)品，價(jià)格非常優(yōu)惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購(gòu)。...

特別提示：包括大腸桿菌0化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：大腸桿菌0化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
英文名稱：E.coli 0 Chemical Competent Cell
產(chǎn)品貨號(hào)：BTN80806
產(chǎn)品規(guī)格：0.1mL*10

 本產(chǎn)品是采用大腸桿菌0菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞，可用于DNA的化學(xué)轉(zhuǎn)化。該菌株是一種用于鋪制與培養(yǎng)質(zhì)粒平板和粘粒平板的重級(jí)缺陷的抑制型株，其φ80lacZΔM15基因產(chǎn)物可與載體編碼的β-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)α 互補(bǔ)，可用于藍(lán)白斑篩選。使用pUC19質(zhì)粒檢測(cè)，轉(zhuǎn)化效率可達(dá)108。本感受態(tài)細(xì)胞具有鏈霉素抗性。

菌株的基因型：F-mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80 lacZΔM15ΔlacX74 recA1 araΔ139Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL(Strr)endA1 nupG。

儲(chǔ)存條件：干冰運(yùn)輸、-80℃保存，有效期半年。

自備試劑：目的DNA、SOC或LB培養(yǎng)基等。

使用方法：
1. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100μl，可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。
以下實(shí)驗(yàn)以50μL感受態(tài)細(xì)胞為例。
2. 待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和)，用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3. 42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘。
4. 每個(gè)離心管中加入450μl 無(wú)菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素)，混勻后置于37℃搖床，150rpm 振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇。
5. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的SOC或LB 固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無(wú)菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開(kāi)，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。

注意事項(xiàng)：
1. 涂布用量可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)調(diào)整。若轉(zhuǎn)化的DNA總量較多，可取少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板；若轉(zhuǎn)化的DNA總量較少，可取200-300μl轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板。若預(yù)計(jì)的克隆數(shù)較少，可通過(guò)離心(4000rpm，2分鐘)后吸除部分培養(yǎng)液，懸浮菌體后將其涂布于平板中。
2. 新制備的固體培養(yǎng)基不易涂干，可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養(yǎng)。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過(guò)少，可以將剩下的菌液再涂布新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。

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貨號(hào)	名稱	規(guī)格
BTN100103B	pression/BTN100103B.html" target="_blank">裂殖酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒	20次
BTN140429	pression/BTN140429.html" target="_blank">大腸桿菌M15化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞	0.1mL*10
BTN140388	pression/BTN140388.html" target="_blank">釀酒酵母NMY51感受態(tài)細(xì)胞	10×100μL
BTN120681	pression/BTN120681.html" target="_blank">兩性霉素B	1mL
BTN120685	pression/BTN120685.html" target="_blank">先鋒霉素溶液	1mL
SY0278	pression/SY0278.html" target="_blank">X-Gluc	100mg
JN0110	pression/JN0110.html" target="_blank">pBalbAvi質(zhì)粒	20次(1μg)

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名稱：λDNA(不含N6-甲基腺嘌呤)
貨號(hào)：BTN90407B
規(guī)格：5μg
本產(chǎn)品Lambda DNA(λDNA)為λ噬菌體中的DNA，是一種常見(jiàn)的DNA底物，分子量為31.5×106Da/48502bp，濃度為200～500μg/ml。A型為普通Lambda DNA。B型為不含N6-甲基腺嘌呤Lambda DNA。C型為非甲基化的cl857 Sam7 λDNA，是從感染的大腸桿菌GM119菌株中分離得到的。該菌株缺乏dam及dcm甲基化酶活性。非甲基化的λDNA以作為對(duì)DNA甲基化敏感的限制性酶的底物。

儲(chǔ)存溶液：Tris-HCl(pH8.0)10mM；EDTA 1mM

儲(chǔ)存條件：低溫運(yùn)輸、-20℃保存、有效期一年。

純度：
1. OD260nm/280nm＞1.8。
2. 瓊脂糖凝膠電泳出現(xiàn)清晰單一條帶。
3. 1μg的λDNA在Hind III酶切Buffer中37℃保溫16小時(shí)后，瓊脂糖凝膠電泳時(shí)出現(xiàn)清晰單一條帶。
4. 1g的λDNA 用Hind III酶切(37℃，2小時(shí))后，在瓊脂糖凝膠電泳時(shí)出現(xiàn)8條清晰的DNA電泳帶。

名稱：裂殖酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒
貨號(hào)：BTN100103A
規(guī)格：20次
本裂殖酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞制備試劑是一種通過(guò)化學(xué)處理，快速制備裂殖酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞，用于長(zhǎng)期凍存以備后續(xù)轉(zhuǎn)化的產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1.一次制備，-80℃保存，多次使用，免去每次轉(zhuǎn)化都要制備裂殖酵母感受態(tài)細(xì)胞。
2. 操作簡(jiǎn)單，單溶液制備，除酵母培養(yǎng)的時(shí)間外，整個(gè)操作只需要30分鐘。
3. 主要用于裂殖酵母S. pombe ，其他多種實(shí)驗(yàn)用酵母菌株zuì好選用酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞制備試劑(BTN81109)。
4. 受體酵母可以不含質(zhì)粒，也可用于攜帶有選擇性質(zhì)粒的酵母(如雙雜交體系中的酵母)。
5. zuì高轉(zhuǎn)化效率可達(dá)到0.2-1×105個(gè)轉(zhuǎn)化子/μg質(zhì)粒DNA。
6. 得到的感受態(tài)細(xì)胞可以用各種線性或環(huán)狀酵母穿梭質(zhì)粒DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)化，例如YIp，YRp，YCp，YEp和YAC等。
7.可以用于酵母雙雜交、定點(diǎn)突變、基因破壞、等位突變基因修復(fù)等實(shí)驗(yàn)。
8. 本產(chǎn)品可以制備20只裂殖酵母感受態(tài)細(xì)胞(需要100mL裂殖酵母培養(yǎng)液)，其中A型只用于制備感受態(tài)細(xì)胞，B型還帶轉(zhuǎn)化液。

試劑盒組成：

組分	BTN100103A	BTN100103B
溶液A	1ml	1ml
裂殖酵母轉(zhuǎn)化液	-	一套(20次)
使用說(shuō)明書	1份	1份

儲(chǔ)存條件：常溫運(yùn)輸及保存，有效期一年。

使用效果：
將一個(gè)酵母菌落接種到SLD培養(yǎng)基中，30℃搖晃培養(yǎng)直到OD600達(dá)到0.6-1.0，冰浴15分鐘后離心棄上清，用自備無(wú)菌水洗滌三次，然后用相當(dāng)于菌液zuì初體積百分之一的溶液A重懸，按每管50μl分裝，放-80℃保存。

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