SK333 土壤全鉀含量測(cè)定(火焰光度法)

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產(chǎn)品名稱(chēng):土壤全鉀含量測(cè)定(火焰光度法)
產(chǎn)品貨號(hào):SK333
產(chǎn)品規(guī)格:咨詢
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名稱(chēng):總SOD活性檢測(cè)試劑盒(WST-8法)
貨號(hào):YT309
規(guī)格:100次
本試劑盒是一種基于WST-8的顯色反應(yīng),通過(guò)比色來(lái)檢測(cè)細(xì)胞、組織或其它樣品中SOD即超氧化物歧化酶活性的試劑盒。本試劑盒可以檢測(cè)細(xì)胞或組織勻漿液上清、全血、紅細(xì)胞抽提物、血清等生物樣品中的SOD活性。一個(gè)試劑盒共可以進(jìn)行100次檢測(cè)。
試劑盒組分:
SOD檢測(cè)緩沖液——————70ml
WST-8——————————800μl
酶溶液——————————100μl
反應(yīng)啟動(dòng)液(40X)——————60μl
超氧化物岐化酶能催化超氧化物陰離子發(fā)生岐化作用,生成過(guò)氧化氫(H2O2)和氧氣(O2),是生物體內(nèi)一種重要的抗氧化酶。
目前有多種SOD活性測(cè)定法,其中NBT(氮藍(lán)四唑)法由于使用方便而被廣泛使用。但NBT法產(chǎn)生的甲臜染料水溶性差,易和被還原的黃嘌呤氧化酶相互作用,抑制百分率達(dá)不到等,從而使檢測(cè)的靈敏度和度受到影響;細(xì)胞色素C法也是一種常用來(lái)檢測(cè)SOD活性的方法,但細(xì)胞色素C其氧化活性高,易受樣品中的還原劑干擾,另外該方法需要連續(xù)測(cè)定吸光度值,對(duì)于SOD的檢測(cè)靈敏度比較低,并且不太適合大批量樣本的檢測(cè)。
目前測(cè)定SOD比較的方法包括WST-1法和WST-8法,其中WST-8法比WST-1法更加穩(wěn)定、靈敏度更高。本試劑盒采用了目前測(cè)定SOD方法中穩(wěn)定性更好、靈敏度更高的的WST-8法。WST-8法的原理參考下圖,WST-8可以和黃嘌呤氧化酶催化產(chǎn)生的超氧化物陰離子反應(yīng)產(chǎn)生水溶性的甲臜染料(formazan dye),該反應(yīng)步驟可以被SOD所抑制。通過(guò)對(duì)WST-8產(chǎn)物的比色分析即可計(jì)算SOD的酶活力。

基于黃嘌呤氧化酶藕聯(lián)反應(yīng)體系和WST-8的SOD酶活力檢測(cè)原理圖。XO:xanthine oxidase。
WST-8的反應(yīng)產(chǎn)物是穩(wěn)定的水溶性產(chǎn)物,可以通過(guò)單個(gè)時(shí)間點(diǎn)的吸光度檢測(cè)來(lái)測(cè)定SOD活力,適合高通量篩選研究。同時(shí)WST-8法測(cè)定SOD酶活力時(shí),zuì大抑制百分率可以接近,并且可以不受一些常見(jiàn)的干擾因素的干擾,使檢測(cè)效果比其它的一些常見(jiàn)方法顯著改善。
本試劑盒的檢測(cè)不受樣品中過(guò)氧化氫的干擾。很多細(xì)胞和組織樣品中含有內(nèi)源性的過(guò)氧化氫,會(huì)干擾SOD的檢測(cè)。本試劑盒通過(guò)添加適量過(guò)氧化氫酶等特殊方法,能有效去除常規(guī)樣品中過(guò)氧化氫的干擾。例如,對(duì)于SOD標(biāo)準(zhǔn)品的檢測(cè),標(biāo)準(zhǔn)品中添加高達(dá)0.1mM的過(guò)氧化氫時(shí),對(duì)于檢測(cè)結(jié)果仍無(wú)顯著影響。
注意事項(xiàng):
1. 待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。
2. 細(xì)胞或組織等樣品制備時(shí)不能采用含有Triton X-100等去垢劑的溶液,否則會(huì)干擾本試劑盒的檢測(cè)。
3. 抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來(lái)的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒(méi)有顏色,如果設(shè)置了使用說(shuō)明中的空白對(duì)照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期6個(gè)月。
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