柱式質粒小量提取試劑盒由北京百奧萊博供貨并提供相關技術服務支持，本品用于科學研究，本品質量穩定，價位合理，需要柱式質粒小量提取試劑盒等DNA提取純化產品的客戶，請到我公司官網聯系我們。...

特別提示：包括柱式質粒小量提取試劑盒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：柱式質粒小量提取試劑盒
英文名稱：Plasmid rapid extraction kit (centrifugal column)
產品貨號：ALH075
產品規格：100次|200次

本試劑盒適用于小規模質粒制備。采用改進SDS-堿裂解法裂解細胞，離心吸附柱內的硅基質膜在高鹽、低pH值狀態下選擇性地結合溶液中的質粒DNA，再通過漂洗液將雜質和其它細菌成分去除，zuì后低鹽、高pH值的洗脫緩沖液將純凈質粒DNA從硅基質膜上洗脫。

試劑盒組份(100次)：
RNaseA(10mg/ml)————————250μl
溶液P1—————————————25ml
溶液P2—————————————25ml
溶液P3—————————————35ml
漂洗液WB————————————25ml
洗脫緩沖液EB——————————15ml
吸附柱和收集管(2ml)———————100套

試劑盒特點：
1.離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異小，可重復性好。克服了國產試劑盒膜質量不穩定的弊端。
2.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、lǜ仿等試劑，也不需要乙醇沉淀。獲得的質粒產量高、純度好， 可以直接用于酶切、轉化、PCR、體外轉錄、測序等各種分子生物學實驗。

注意事項
1. 本試劑盒適用菌株為XL-1 Blue和DH5α等核酸酶含量低缺陷型菌株。所用菌株為JM系列、HB101等endA菌株或野生型菌株，核酸酶含量豐富，應購買本公司生產的高純度質粒小量快速提取試劑盒。
2. 所有的離心步驟均在室溫完成，使用轉速可以達到13000rpm的傳統臺式離心機，如Eppendorf 5415C 或者類似離心機。
3. 溶液P3中含有刺激性化合物，操作時要戴乳膠手套，避免沾染皮膚、眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時，要用大量清水或者生理鹽水沖洗。
4. 提取質粒的量與細菌培養濃度、質粒拷貝數等因素有關。一般高拷貝質粒，建議接種單菌落于1.5～4.5ml加合適抗生素的LB培養基， 過夜培養14～16個小時，可提取出多達20μg的純凈質粒。如果所提質粒為低拷貝質粒或大于10kb的大質粒，應適當加大菌體使用量，使用5～10ml過夜培養物，同時按比例增加P1、P2、P3的用量，其它步驟相同。
5. 得到的質粒DNA可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。OD260值為1相當于大約50μg/ml DNA。電泳可能為單一條帶，也可能為2條或者多條DNA條帶，這主要是不同程度的超螺旋構象質粒泳動位置不一造成，與提取物培養時間長短、提取時操作劇烈程度等有關。本公司產品正常操作情況下基本超螺旋可以超過90%。
6. 質粒DNA確切分子大小， 必須酶切線性化后，對比DNA分子量Marker才可以知道。處于環狀或者超螺旋狀態的的質粒，泳動位置不確定，無法通過電泳知道其確切大小。
7. 洗脫液EB不含有螯合劑EDTA，不影響下游酶切、連接等反應。也可以使用水洗脫，但應該確保pH大于7.5，pH過低影響洗脫效率。用水洗脫質粒應該保存在－20℃。質粒DNA如果需要長期保存，可以用TE緩沖液洗脫（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影響下游酶切反應，使用時可以適當稀釋。

儲存條件：室溫，有效期12個月。

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