動物組織細胞DNA提取試劑盒的品牌是百奧萊博，是優質的DNA提取純化產品，本制品用于科研目的，本品質量穩定，價位合理，需要動物組織細胞DNA提取試劑盒等DNA提取純化產品的客戶，請到我公司官網聯系我們。...

特別提示：包括動物組織細胞DNA提取試劑盒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：動物組織細胞DNA提取試劑盒
英文名稱：Animal tissue cell DNA Extraction Kit
產品貨號：RFT035
產品規格：50次|100次

本試劑盒采用可以特異性結合DNA的離心吸附柱和獨特的緩沖液系統，能提取多種細胞/組織中的基因組DNA。離心吸附柱可以、專一吸附DNA，可zuì大限度去除雜質蛋白及細胞中其他有機化合物。提取的基因組DNA片段大，純度高，質量穩定可靠。使用本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規操作，包括酶切、PCR、文庫構建、Southern雜交等實驗。

提取效率：
動物細胞培養液(樣本量10^6～10^7)：5～30 μg
動物組織(樣本量30mg)：10～30μg

試劑盒組分;

組份	50次	100次	貯存方式
緩沖液GA	15 ml	30 ml	室溫
緩沖液GB	15 ml	30 ml	室溫
去蛋白液GD(濃縮液)	18 ml	36 ml	室溫
漂洗液PW(濃縮液)	25 ml	25ml	室溫
洗脫緩沖液EB	15 ml	15 ml	室溫
蛋白酶K(20 mg/ml)	1ml	2×1ml	-20℃
RNase A(10 mg/ml)	0.5 ml	1 ml	-20℃
吸附柱CG	50個	100個	室溫
收集管(2 ml)	50個	100個	室溫
說明書	1份	1份

準備工作：
1. 準備55℃和70℃水??；無水乙醇；1.5ml滅菌離心管。
2. 按照標簽所示在去蛋白液GD和漂洗液PW中加入無水乙醇，混勻后蓋緊瓶蓋后室溫貯存備用。
3. 每次使用前請檢查緩沖液GA，緩沖液GB和去蛋白液GD是否有沉淀生成，如果出現沉淀，37℃溫浴至沉淀溶解后再使用。

操作步驟：
如非指出，所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。

1、處理材料：
a. 培養細胞：貼壁培養的細胞應先處理為細胞懸液(如用PBS緩沖液或類似緩沖液)，10,000 g離心1分鐘，倒盡上清，加入200μl緩沖液GA，振蕩至徹底懸浮。
b. 組織：取約30mg動物組織(脾組織用量應少于10 mg)加入到事先盛有200μl 緩沖液GA的1.5ml離心管中，用研磨杵徹底將組織研碎。
2、加入20μl蛋白酶K (20 mg/ml)溶液。
a. 提取細胞基因組時，加入蛋白酶K混勻后，55℃放置5-10分鐘。
b. 提取組織基因組時，加入蛋白酶K混勻后，在55℃放置，直至組織溶解。
注：不同組織裂解時間不同，通常需1-3小時即可完成(鼠尾需要消化過夜),期間間歇顛倒混勻樣品。
3、加入10μl RNaseA(10 mg/ml)溶液，混勻后室溫放置2分鐘。
4、加入220μl緩沖液GB，充分顛倒混勻，70℃放置10分鐘，溶液應變清亮，簡短離心以去除管蓋內壁的水珠。
注：加入緩沖液GB時可能會產生白色沉淀，一般70℃放置一段時間后會消失。如溶液未變清亮，說明細胞裂解不徹底，會影響DNA的純度和得率，而且可能導致步驟6中離心柱堵塞。
5、加入220μl 無水乙醇，顛倒混勻，簡短離心以去除管蓋內壁的水珠。
注：加入乙醇后會產生絮狀沉淀，可用槍頭反復抽打1-2次將沉淀弄碎后再上柱。如果絮狀物未做處理，容易導致步驟6中離心柱的堵塞。
6、將上一步所得溶液和絮狀沉淀都加入一個吸附柱CG中(吸附柱放入收集管中)，11000g離心2分鐘，倒掉廢液，吸附柱CG放回收集管中。
注：如果出現吸附柱堵塞現象，可將離心時間延長到5分鐘。
7、向吸附柱CG中加入500μl去蛋白液GD(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，11000g離心1分鐘，倒掉廢液，吸附柱CG放入收集管中。
8、向吸附柱CG中加入700μl 漂洗液PW(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，11000g離心1分鐘，倒掉廢液，吸附柱CG放入收集管中。
9、向吸附柱CG中加入500μl 漂洗液PW(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，11000g離心1分鐘，倒掉廢液。
10、將吸附柱CG放回廢液收集管中，11000g離心2分鐘。
注：此步驟非常重要，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除。漂洗液中乙醇的殘留會影響后續的酶反應(酶切、PCR等)實驗。
11、將吸附柱CG轉入一個干凈的離心管中，向吸附膜的中間部位懸空滴加100μl經70℃水浴預熱的洗脫緩沖液EB，室溫放置2分鐘，11000g離心2分鐘。
注意：
a.洗脫緩沖液體積zuì好不少于100μl，體積過小影響回收效率。
b.洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響。若用水做洗脫液應保證其pH值在7.0-8.5范圍內，pH值低于7.0會降低洗脫效率。
12、DNA產物-20℃保存。

儲存條件：室溫，有效期12個月。

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名稱：非凍型尿液DNA保存液
貨號：BTN90315
規格：100mL
本品在室溫條件下長期保存用于DNA提取的尿液樣品保存液。它能夠、長期保證DNA分子的完整性。

產品特點：
1. 保存時間長，可室溫保存尿液DNA長達六個月，尤其適合于野外尿液樣品采集。
2. DNA完整性好，純化后長度在20-50 Kb之間。
3. DNA無化學修飾，提得的DNA可用于酶切、電泳、Southern雜交和PCR等分子生物學實驗。
4. 能防止尿液在4℃結晶。
5. 安全可靠，本產品無害。
6. 使用簡單，直接把新鮮的尿液樣品與本產品混合即可。

儲存條件：室溫運輸及保存，有效期兩年。

使用方法：(以DNA提取為例)
1. 迅速將尿液與本產品按10:1的比例混合。
2. 常溫閉光保存直到使用。
3. 使用常規液體DNA提取方法提取DNA即可。推薦使用柱式尿液DNA提取試劑盒(BTN90314)，使用柱式尿液DNA提取試劑盒提取本產品保存的尿樣，兼容性好，提取效率更高。
4. 提取得到DNA可用于酶切、電泳、Southern雜交和PCR等分子生物學實驗。

名稱：菌體內毒素清除劑
貨號：BTN90901
規格：200mL
內毒素是E.coli細胞壁的主要成分，傳統的去除內毒素的方法是將內毒素和DNA一起純化出來，然后再用各種方法去除其中的內毒素，操作繁瑣，DNA 回收率低。本產品可以直接把E.coli 表面的內毒素去除，從根本上避免了內毒素對后續操作(如質粒DNA提取，重組蛋白質提取)的污染。

產品特點：
1. 個在菌體收集階段去除內毒素的產品，從源頭上避免了內毒素跟DNA和胞漿蛋白的接觸，從根本上防止了可能產生的污染。
2. 操作簡單快速，用酶溶液溫和清洗菌體3-4次即可去掉細菌表面的內毒素，只需要10分鐘左右時間，不需要復雜儀器設備。
3.，能去除99%以上的內毒素。
4.跟各種質粒DNA提取、基因組DNA提取和蛋白質提取等操作兼容，DNA丟失率只有10%左右(其他方法DNA 丟失率可以高達50%)。
5. 不影響DNA和大部分蛋白質的活性，處理過的質粒DNA可用于轉染實驗。
6. 既可小規模使用(在1.5mL離心管內)，也可放量用于大規模無內毒素質粒DNA提取和無內毒素蛋白質純化。

儲存條件：常溫運輸和保存，有效期一年。

使用方法：

一：用于菌液小于3mL的樣品
1. 收集1.5-3mL E.coli 飽和菌液，12000rpm離心1分鐘，棄上清，得到細菌沉淀。
2. 加入1mL 本產品溫和混勻后10,000-12000rpm離心1分鐘，棄上清(含內毒素)。
3. 再重復上述操作3-4次，得到的菌體可以直接進入后續的無內毒素質粒DNA提取或無內毒素蛋白質提取程序。

二：用于菌液多于3mL的樣品
整個操作同上，只是在15或50mL塑料離心管中進行，離心速度不能超過離心管的承受力，本產品的用量按比例增加。

疑難解答：
Q:為何用常規的方法很難去除生物樣品中的內毒素?
A:因為內毒素帶電性跟DNA和部分蛋白質相同，所以基于帶電性的分離方法(如硅膠膜吸附，離子交換吸附)不能將它們分開;同時內毒素又是雙性分子(類似于細胞膜的磷脂分子)，能夠形成大小不等的聚合物，跟質粒DNA和蛋白質大小接近，所以基于分子量大小的分離方法(如凝膠排阻過濾和氯化銫超速離心)也不能將其有效分離。

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