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產品詳情

BTN70804 一步法單菌落質粒DNA提取試劑盒

  • 產品/服務:BTN70804 一步法單菌落質粒DNA提取試劑盒
  • 型 號:BTN70804
  • 品 牌:百奧萊博
  • 單 價:面議 
  • 更新日期:2023-04-03
  • 有效期至:長期有效
  • 瀏覽次數:826
產品簡介

一步法單菌落質粒DNA提取試劑盒由北京百奧萊博供貨并提供相關技術服務支持,本品用于科研試驗,一步法單菌落質粒DNA提取試劑盒是我司眾多優質DNA提取純化之一,質量堪比同類進口產品,價格非常優惠,目前正熱烈促銷中,恭候您的咨詢訂購。...

產品詳細介紹

特別提示:包括一步法單菌落質粒DNA提取試劑盒在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!


產品名稱:一步法單菌落質粒DNA提取試劑盒
英文名稱:One-step single colony plasmid DNA extraction Kit
產品貨號:BTN70804
產品規格:50次

本試劑盒是在一步式質粒DNA提取試劑盒(BTN70301)基礎上開發的、能夠從單個菌落快速提取質粒DNA的產品。它之所以能夠從單個菌落中提取到可以用常規電泳方法檢測得到的質粒DNA是由于一步式細菌裂解技術能夠使細菌釋放出其幾乎所有的質粒DNA。

試劑盒特點:
1. 不需過夜培養細菌就可以提取質粒DNA,能為研究人員節約一天的寶貴時間。
2.快速,整個過程只需要不到十分鐘(對一個樣品而言)。
3.一步式裂解細菌,不使用強堿溶液,對DNA 損傷小。
4. 得到的質粒DNA 足夠1-2次電泳或酶切實驗,足夠多次PCR、測序和細菌轉化實驗。
5.適用于高拷貝、中拷貝和低拷貝的質粒。

試劑盒組成:
成分 規格
溶液A 5ml
離心吸附柱 50只
離心吸附柱收集管 50只
通用預洗液 50ml
通用洗柱液 100ml
DNA洗脫液2.0 10ml
說明書 1份


儲存條件:常溫運輸及保存(溶液A需要4℃保存),有效期一年。

使用方法:
1. 用吸頭挑取一個直徑在2 mm以上的菌落到100μl一步法單菌落質粒DNA提取試劑盒溶液A中(溶液A用前搖勻),充分吹打或振蕩裂解直到裂解液變澄清。
2. 直接將裂解液全部轉移到離心吸附柱中,室溫靜置2分鐘使質粒DNA與膜結合。室溫12000~15000g離心半分鐘,棄穿透液。
3.在離心吸附柱中加入0.7mL的通用預洗液,室溫12000~15000g離心半分鐘,棄穿透液。注意: 如果通用預洗液放置在低溫產生了沉淀,用前需要加熱到60℃左右使之融化,混勻后再用。
4. 再在離心吸附柱中加入0.3mL的通用預洗液,室溫12000~15000g離心半分鐘,棄穿透液。此步預洗zuì好別省略,否則DNA 純度不高。
5.在離心吸附柱中加入0.7mL的通用洗柱液,室溫12000~15000g離心半分鐘,棄穿透液。
6. 再在離心吸附柱中加入0.7mL的通用洗柱液,室溫12000~15000g離心半分鐘,棄穿透液。此為第二次洗滌。
7. 再在離心吸附柱中加入0.4mL的通用洗柱液,室溫12000~15000g離心半分鐘,棄穿透液。此為第三次洗滌,如果不洗滌三次,zuì后得到的質粒DNA的OD260和280的比值達不到1.8。
8.室溫12000~15000g離心半分鐘,甩干殘留液體。注意:此步不能省略,否則殘留乙醇會影響后續的電泳上樣(DNA 沉不到加樣孔里去)和酶反應。
9. 將離心柱置于一個新的1.5mL自備塑料離心管中,加入30-100μl DNA洗脫液2.0,室溫放置2分鐘。如果將DNA 洗脫液2.0預熱到65-80℃,則效果更好。
10.室溫12000~15000g離心半分鐘,離心管底部溶液即為質粒DNA,可以直接用于后續實驗或放冰箱長期保存。

根據您的關注的一步法單菌落質粒DNA提取試劑盒,您可能還對以下產品有需求:



名稱:海洋動物DNA提取試劑盒(柱式提取)
貨號:BTN130401
規格:50次
本試劑盒是在柱式動物DNA提取試劑盒(BTN71206)試劑盒基礎上優化改良而得,專門針對海洋動物的基因組DNA提取的試劑盒,可用于魚類、蝦類、貝類、蟹類等海洋動物和水產動物的荃因組DNA提取,可以有效去除海洋動物組織中的蛋白、脂肪及其他有機化合物等雜質。

產品特點:
1. 使用本試劑盒提取的基因組DNA可適用于各種常規分子生物學操作,如:酶切、PCR、文庫構建、Southern雜交等試驗。
2. 操作簡單安全,1小時內即可獲得超純的基因組DNA,純化過程中不需要使用苯酚氯fǎng等有機試劑。
3. 應用廣泛,適用于多種動物細胞和動物組織等。
4. 高,質量和國外同類試劑盒相當,價格更低。

試劑盒組成:
成分 規格
溶液A 50ml
蛋白酶K溶液(20mg/mL) 1ml
溶液B 15ml
溶液C 13ml
離心吸附柱 50套
通用洗柱液 15ml
通用洗脫液 15ml
說明書 1份


儲存條件:常溫運輸及保存(蛋白酶K溶液需要低溫運輸,-20℃保存),有效期一年。

使用方法:
使用前請先在溶液C和通用洗柱液中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標簽。

1. 切取不多于30mg的組織材料,放入裝有200μL溶液A的離心管中,渦旋振蕩15秒。注意:根據提取的組織不同,起始量也稍有不同,腮的細胞量較大,一般建議提取量不超過20mg。如果需要去除RNA,可加入40μL RNase A(10mg/mL)溶液(客戶自備,BTN3160),振蕩15秒,室溫放置5分鐘。
2. 加入20μL蛋白酶 K溶液(20mg/mL),渦旋混勻,簡短離心以去除管蓋內壁的水珠。在56℃下放置,直至組織完全溶解,簡短離心以去除管蓋內壁的水珠,再進行下一步驟。注意:不同組織裂解時間不同,通常需0.5-2小時即可完成。扇貝組織0.5小時基本可裂解完全,蝦和魚類組織1小時。每小時振蕩混合樣品2-3次,每次振蕩混勻15秒。
3. 加入200μl溶液B,充分顛倒混勻,70℃放置10分鐘,溶液應變清亮,簡短離心以去除管蓋內壁的水珠。注意:加入溶液B時可能會產生白色沉淀,一般70℃放置時會消失,不會影響后續實驗。如溶液未變清亮,說明細胞裂解不徹底,可能導致提取DNA 量少和提取出的DNA 不純。
4. 加入200μl 無水乙醇,充分顛倒混勻,此時可能會出現絮狀沉淀,簡短離心以去除管蓋內壁的水珠。
5. 將上一步所得溶液和絮狀沉淀都加入一個離心吸附柱中(吸附柱放入收集管中),12000rpm(~13,400×g)離心30秒,倒掉廢液,將吸附柱放回收集管中。
6. 向離心吸附柱中加入500μl溶液C(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm(~13,400×g)離心30秒,倒掉廢液,將吸附柱放入收集管中。
7. 向吸附柱中加入600μl 通用洗柱液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm(~13,400×g)離心30秒,倒掉廢液,將吸附柱放入收集管中。
8. 重復操作步驟7。
9. 將吸附柱放回收集管中,12000rpm(~13,400×g)離心2分鐘,倒掉廢液。將吸附柱置于室溫放置數分鐘,以徹底晾干吸附材料中殘余的漂洗液。注意:這一步的目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,漂洗液中乙醇的殘留會影響后續的酶反應(酶切、PCR等)實驗。
10. 將吸附柱轉入一個干凈的離心管中,向吸附膜的中間部位懸空滴加50-200μl 通用洗脫液,室溫放置2-5分鐘,12000rpm(~13,400×g)離心2分鐘,將溶液收集到離心管中。注意:通用洗脫液的體積不應少于50μl,體積過小影響回收效率。為增加基因組DNA的得率,可將離心得到的溶液再加入吸附柱中,室溫放置2分鐘,12000rpm(~13,400×g)離心2分鐘。洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響。若用超純水做洗脫液應保證其pH值在7.0-8.5 范圍內,pH值低于7.0會降低洗脫效率;且DNA產物應保存在-20℃,以防DNA 降解。

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