柱式無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA提取試劑盒由專業(yè)試劑供應(yīng)商北京百奧萊博提供，用于科學(xué)研究，我公司的柱式無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA提取試劑盒品質(zhì)上佳，經(jīng)過(guò)多年的開(kāi)發(fā)生產(chǎn)，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購(gòu)。...

特別提示：包括柱式無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA提取試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：柱式無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA提取試劑盒
英文名稱：Endotoxin-free plasmid DNA column extraction kit
產(chǎn)品貨號(hào)：BTN60807
產(chǎn)品規(guī)格：50次

本試劑盒是整合我們公司柱式質(zhì)粒DNA提取和菌體內(nèi)毒素清除劑兩產(chǎn)品而成。菌體內(nèi)毒素清除劑是我們公司推出的產(chǎn)品，在質(zhì)粒提取前就把細(xì)胞壁上的內(nèi)毒素清除掉，徹底避免了目前通用的先提取DNA+內(nèi)毒素混合物，再?gòu)闹屑兓|(zhì)粒DNA的弊端。用本產(chǎn)品提取的質(zhì)粒DNA，內(nèi)毒素的污染濃度低，適合于轉(zhuǎn)染等對(duì)內(nèi)毒素的污染敏感的實(shí)驗(yàn)。

試劑盒特點(diǎn)：
1. 操作簡(jiǎn)單，只在經(jīng)典的柱式質(zhì)粒DNA提取前，增加菌體內(nèi)毒素清除一步。
2. 去內(nèi)毒素效果好，處理一次可以去除99%以上的內(nèi)毒素。
3.質(zhì)粒丟失少，產(chǎn)率只比柱式質(zhì)粒DNA提取低5-10%，效果好于先提質(zhì)粒DNA，再用液相內(nèi)毒素清除劑處理的方法。
4. DNA可以直接用于轉(zhuǎn)染等實(shí)驗(yàn)。

試劑盒組成：

成分	規(guī)格
菌體內(nèi)毒素清除劑	200ml
溶液A	13ml
溶液B	13ml
RNase A(10mg/mL)	150μl
離心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脫液2.0	10ml
說(shuō)明書(shū)	1份

儲(chǔ)存條件：常溫運(yùn)輸及保存，有效期一年。RNase A(10mg/mL)需要低溫運(yùn)輸和保存。

使用方法：

一: 用菌體內(nèi)毒素清除劑清除E.coli細(xì)胞壁上的內(nèi)毒素。
1. 收集1.5-3mL E.coli飽和菌液，12000rpm離心1分鐘，棄上清，得到細(xì)菌沉淀。
2. 加入1mL本產(chǎn)品溫和混勻后10,000-12000rpm離心1分鐘，棄上清(含內(nèi)毒素)。
3. 再重復(fù)上述操作3-4次，得到的菌體可以直接進(jìn)入后續(xù)的質(zhì)粒DNA提取步驟。
二：從無(wú)內(nèi)毒素的E.coli中提取質(zhì)粒DNA
1. 用1.5mL離心管收集1-4mL 過(guò)夜培養(yǎng)飽和菌液，12000rpm離心1分鐘，棄上清，再短暫離心，吸棄殘留液體。
2. 加入250μl溶液A，用槍頭充分吹打使菌體重懸。
3. 加入250μl溶液B(如果有沉淀，用前須37℃加熱溶解后冷卻到室溫方可使用)，溫和反復(fù)顛倒混勻4-6次，看到溶液變粘即可。千萬(wàn)不要?jiǎng)×艺袷帯?br /> 4. 加入350μl溶液C，反復(fù)顛倒混勻4-6次，可見(jiàn)白色沉淀物產(chǎn)生，然后冰上靜止2-5分鐘。注意：不要超過(guò)5分鐘。
5.室溫12000rpm離心10分鐘，將上清液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，室溫放置2分鐘。
6. 12000rpm離心1分鐘，質(zhì)粒DNA吸附到膜上，棄收集管中的廢液。
7. 加入500μl的通用洗柱液，12000rpm離心1分鐘，棄收集管中的廢液。注意：我們公司的通用洗柱液是由乙醇和含NaCl的溶液組成，NaCl在其中的溶解度較低，放置一段時(shí)間后可能會(huì)產(chǎn)生NaCl沉淀。如果有沉淀，用前zuì好加熱使之溶解并混勻后使用。
8. 重復(fù)上步操作1次。
9. 12000rpm離心1分鐘，甩干殘留液體。此步不能省略，否則殘留乙醇會(huì)影響后續(xù)的電泳上樣(DNA沉不到加樣孔里去)和酶反應(yīng)。
10. 將離心柱置于新的1.5mL離心管(自備)中，加入50μl DNA洗脫液2.0，室溫放置2分鐘。
11. 12000rpm離心1分鐘，離心管底溶液即質(zhì)粒DNA。
12. 由于天我們公司的吸附柱結(jié)合DNA能力較強(qiáng)，需要再加入50μl DNA洗脫液2.0到離心吸附柱中，室溫放置2分鐘，重復(fù)上步操作，往往還能洗脫下很多質(zhì)粒DNA(相當(dāng)于次洗脫的20-30%)。注意不要使用上步得到的含有DNA的洗脫液來(lái)進(jìn)行第二次洗脫。
13. 將兩次洗脫收集到的質(zhì)粒DNA匯集即可立即使用或放冰箱保存。

根據(jù)您的關(guān)注的柱式無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA提取試劑盒，您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求：

貨號(hào)	名稱	規(guī)格
BTN71204	柱式凝固血液DNA提取試劑盒	50次
BTN60807	柱式無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA提取試劑盒	50次
WE0177	柱式中量血液基因組DNA提取試劑盒(1～5ml)	50次
ALH116	大量全血基因組DNA提取試劑盒(10ml)	16次×10ml|96次×10ml
ALH603	植物大量DNA快速提取試劑盒(CTAB法)	10次
ALH178	唾液DNA收集提取試劑盒	10次|50次

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名稱：柱式毛發(fā)DNA提取試劑盒
貨號(hào)：BTN80805
規(guī)格：50次
動(dòng)物毛發(fā)不容易降解，同時(shí)含有大量的線粒體，所以是考古研究、法醫(yī)研究和線粒體研究等領(lǐng)域的重要性實(shí)驗(yàn)材料。目前市場(chǎng)上專門(mén)用于毛發(fā)樣品DNA提取的產(chǎn)品很少，為此我們研發(fā)了本產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1.充分的酶法降解和快速的柱式提取相結(jié)合，前者使DNA充分釋放，后者使雜質(zhì)充分被去除。
2.DNA回收率一般在0.5μg/100mg左右(理論產(chǎn)率一般是0.1-1.5μg之間)。
3.DNA純度高，OD比值一般在1.6-1.8之間。
4.提取的DNA能夠用于電泳、酶切、雜交檢測(cè)和PCR。
5.適合于動(dòng)物的各種毛發(fā)。

試劑盒組成：

成分	規(guī)格
溶液A	50mL
蛋白酶K溶液(10mg/ml)	1mL
溶液B	15mL
溶液C	50mL
離心吸附柱(15層膜)	50套
通用洗柱液	50mL
DNA洗脫液	5mL
說(shuō)明書(shū)	1份

儲(chǔ)存條件：常溫運(yùn)輸及保存(蛋白酶K溶液需要-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：
1.將30-50mg左右毛發(fā)充分剪碎(成芝麻大小就可以)，zuì后轉(zhuǎn)移到一個(gè)干凈的1.5mL塑料離心管中。注意：zuì好從靠近根部的地方剪取樣品。
2.加入1mL溶液A(使用之前需取本次實(shí)驗(yàn)所需的溶液A現(xiàn)加入自備的β-巰基乙醇，β-巰基乙醇的終濃度為5%)和20μL蛋白酶K溶液(20mg/mL)，37℃保溫10小時(shí)(一般過(guò)夜保溫就可以)。
 注意：zuì好讓反應(yīng)體系處于搖晃狀態(tài)，此保溫長(zhǎng)度一般可以讓毛發(fā)溶化。
3.加入0.3mL的溶液B和0.2mL的自備氯f(wàn)ǎng，振蕩器上振蕩30秒充分混勻。
4.12000rpm室溫離心3分鐘，小心將上清轉(zhuǎn)移到新的1.5mL塑料離心管中。
5.在上清液中加入等體積的溶液C，上下顛倒30秒充分混勻。
6.將混合液分兩次轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中。每次是先將0.7-0.8mL混合液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，室溫放置2分鐘，12000rpm室溫1分鐘，棄穿透液。再把剩余的一半上柱，重復(fù)此操作。
7.將0.7mL通用洗柱液加入到離心吸附柱中，12000rpm室溫離心半分鐘，棄穿透液。
8.將0.3mL通用洗柱液加入到離心吸附柱中，12000rpm離心半分鐘(此步為第二次洗滌，一般可以省略)。
9.空甩離心吸附柱半分鐘去除殘留液體。
10.將離心吸附柱放置在一新的1.5mL塑料離心管中，加入30μL通用洗脫液。
11.12000rpm離心1分鐘，管底即為毛發(fā)DNA溶液，可立即用于PCR，也可長(zhǎng)期保存在－20℃。
 注意：由于頭發(fā)中DNA的含量十分少，所以電泳檢測(cè)時(shí)即使全部上樣也只能看見(jiàn)十分微弱的DNA條帶。

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