什么是二抗？

二抗是指用于靶向結(jié)合一抗的抗體。在多種免疫印跡、ELISA以及免疫熒光等免疫實(shí)驗(yàn)中，二抗經(jīng)常和一抗結(jié)合使用以檢測(cè)目標(biāo)蛋白。很多二抗都帶有標(biāo)記物，例如Alexa Fluor熒光染料或辣根過(guò)氧化物酶（HRP），從而使二抗的信號(hào)可以被檢測(cè)到。

實(shí)驗(yàn)中也可以使用帶有標(biāo)記物的一抗，但是二抗有很多優(yōu)點(diǎn)。無(wú)論是使用哪種一抗進(jìn)行檢測(cè)，使用二抗可便于換不同的標(biāo)記物。例如，同樣的一抗可以與HRP標(biāo)記二抗一起用于免疫印跡，也可以與另一種Alexa Fluor 488熒光標(biāo)記二抗一起用于免疫熒光實(shí)驗(yàn)。

另外，二抗結(jié)合在抗原位置的標(biāo)記染料比直標(biāo)一抗要多，從而增強(qiáng)檢測(cè)信號(hào)。使用二抗可以避免對(duì)一抗進(jìn)行復(fù)雜且昂貴的化學(xué)標(biāo)記（偶聯(lián)），而且偶聯(lián)反應(yīng)（具有氨基酸特異性）可能干擾一抗對(duì)抗原的識(shí)別。

選擇合適的二抗

要選擇出一種適用于您的應(yīng)用和研究的佳二抗，建議考慮以下因素：

• 種屬來(lái)源和種屬反應(yīng)性
• 特異性反應(yīng)
• 純化方法
• 交叉吸附
• 多重檢測(cè)能力
• 抗體類(lèi)型和亞型
• 完整抗體還是抗體片段
• 標(biāo)記物
• 生物素結(jié)合蛋白