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古朵快訊:細胞因子溶解操作方法及注意事項
發布時間:2023-05-05瀏覽次數:834返回列表
古朵快訊:細胞因子溶解操作方法及注意事項
1.離心:高速離心 (10, 000 rpm) 20-30 秒,或低速離心 (2, 000 rpm) 5 分鐘。
2.溶解(Reconstitution):用去離子水或其它緩沖液(根據說明書要求進行選擇)溶解至說明書要求的濃度 (一般為 0.1-1.0 mg/mL,如10ug的產品,需用10uL-100uL的去離子水或緩沖液溶解)。溶解時不可振蕩,避免因化學鍵的斷裂造成蛋白失活,可加入適當的溶劑輕搖并靜置一段時間,待細胞因子*溶解后使用。溶劑的選擇:
1)要求用去離子水溶解的產品,務必不可用鹽溶液,避免過高的鹽濃度造成蛋白不可逆的析出;
2) 要求用鹽溶液溶解的產品,請依照說明書上的濃度,同樣也是為了避免過高的鹽濃度。
3.分裝和貯存(Aliquot and Storage):蛋白溶解后可根據自己的實驗需要進一步稀釋成工作液,稀釋可用RPMI 1640、DMEM或PBS等溶液,其中含有5-10%的FCS (小牛或胎牛血清)或0.5 %的BSA(牛血清白蛋白)來穩定蛋白。工作液在4℃可保存1周,如需長期保存,則需分裝凍存于-20℃ (注意:不可凍存于-80℃)。分裝時每管中工作液的體積是一次實驗的用量,以實現每次實驗用完一只工作液,避免反復凍融引起蛋白活性的降低。
細胞因子上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品,勵志研發和銷售的綜合性生物公司,產品遠銷多個國家和地區,我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求”的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向,不斷開發高質量的新產品,提供客戶滿意的綜合服務質量”的方針。