古朵闡述：瓊脂糖凝膠電泳的制備過程

  瓊脂糖是實驗室常用的試劑之一，但是瓊脂糖凝膠電泳的制備過程也不簡單，接下來古朵生物技術(shù)小編就為大家詳細(xì)介紹一下制備過程。

  一、用稱量紙片電子天平取0.3g的瓊脂粉;

  二、配30ML的1*10的TBST緩沖液與100ml的三角燒瓶里;

  三、倒入瓊脂粉搖勻，并轉(zhuǎn)到微波爐中加熱溶解;

  四、用手套取出到?jīng)鏊陨粤罌鲋翜責(zé)岷?約60℃)，加入核酸酶(Eb替代物)2ul;要邊加邊搖勻，使之充分搖勻;

  五、取電泳槽內(nèi)的有機玻璃內(nèi)槽(制膠槽)洗干凈,晾干，放入制膠玻璃板.取透明膠帶將玻璃板與內(nèi)槽兩端邊緣封好，形成模子。

  將內(nèi)槽置于水平位置,并在固定位置放好梳子.將冷卻到65℃左右的瓊脂糖凝膠液混勻小心地倒入內(nèi)槽玻璃板上，使膠液緩慢展開，直到整個玻璃板表面形成均勻膠層。

  室溫下靜置直至凝膠凝固,垂直輕拔梳子，取下膠帶，將凝膠及內(nèi)槽放入電泳槽中。

  注意：制備過程中請戴好手套;梳齒處不可存在氣泡，液面應(yīng)保持平整無波紋。

  開始跑膠

  一、膠凝后取膠放到電泳槽中，倒入電泳液至浸過凝膠。

  二、從冰箱中取出MARK和loading buffer，加入6ULloading buffer到樣品中混勻;然后用加樣槍分別加到凝膠的大孔中(要緩慢加，不要穿破凝膠，后槍不要打盡以至于有空氣使樣品吹打出來);MARK加到小孔中的任一孔(記住位置)。

  三、蓋上電泳槽，加樣后的凝膠板立即通電進行電泳，電壓60-100V，樣品由負(fù)極(黑色)向正極(紅色)方向移動，電壓升高，瓊脂糖凝膠的有效分離范圍降低，當(dāng)溴酚藍移動到距離膠板下沿約1cm處時，停止電泳。

  四、使用凝膠成像儀拍照，觀察條帶(mark或樣品是否有條帶顯示)。

  觀察方法

  電泳時間依據(jù)實驗的具體要求而定，在電泳中途可以使用紫外燈直接觀察，也可以根據(jù)指示劑確定條帶的遷移位置，各條區(qū)分開后電泳結(jié)束，取出凝膠直接檢測拍照。

  拿到膠體條帶圖譜后，找到marker，根據(jù)marker就可以確定目標(biāo)條帶了。

  上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠銷多個國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場需求為導(dǎo)向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠銷多個國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場需求為導(dǎo)向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。