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北京萊普特科學儀器有限公司

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細菌的培養和生長現象的觀察

發布時間:2013-07-29瀏覽次數:1714返回列表

一、實驗目的
    1.了解常用培養基的種類。
    2.掌握無菌操作,建立無菌觀念。
    3.初步掌握細菌接種技術。
    4.學會觀察細菌在常用培養基上的生長現象。
    二、實驗材料
    1.菌種葡萄球菌、大腸埃希菌。
    2.培養基普通瓊脂平板、斜面培養基、半固體培養基、液體培養基。
    3.器材接種環、接種針、酒精燈、培養箱、試管架等。
    三、實驗內容
    (一)細菌的接種方法
    平板劃線接種法分離培養法)
    【實驗原理】
    通過在平板上劃線,將混雜的細菌在瓊脂平板表面充分的散開,使單個細菌能固定在一點生長形成單個菌落,以達到分離純種的目的。若需從平板上獲取純種,則挑取一個菌落做純培養。
    【操作方法】(分段劃線法)
    1.右手拿接種環,燒灼冷卻后,以無菌操作方法蘸取細菌標本少許。
    2.左手持瓊脂平板,以左手拇指和食指將平板蓋啟開,右手將取了菌液的接種環伸人平板,將已葫菌的接種環在瓊脂表面密集而不重疊地來回劃線,面積約占整個平板的1/6- 1/5,此為區劃線。
    3.將接種環置于火焰上滅菌,冷卻后(可接觸平板試之,如不融化瓊脂,即已冷卻),開始第二區來回劃線,且在開始劃線時與區的劃線相交數次(2-3次為宜),以后劃線不再相交。
    4.后用同樣方法進行第三區,必要時也可繼續第四區、第五區劃線(圖5-1)

    5.接種完畢,接種環經火焰滅菌后,放回原處;蓋好培養皿蓋子,倒置(平板底部向上),做好標記;放37℃溫箱培養18-24h后,觀察結果。注意是否分離出單個菌落,并記錄菌落特征如大小、形狀、透明度、色素等。
    【注意事項】
    1.嚴格無菌操作,避免空氣及呼吸道中的細菌落人培養墓內。
    2.劃線接種時,角度、力度要掌握好,接種環與瓊脂成30°~40°角輕輕接觸,利用腕力滑動,切忌劃破瓊脂,并充分利用平板的表面積,以達到分離的目的。