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簡述梯度PCR儀的適用范圍與使用要點
發布時間:2017-08-30瀏覽次數:2202返回列表
梯度PCR儀是由普通PCR儀衍生出的帶梯度PCR功能的基因擴增儀。PCR反應能否成功,退火溫度是關鍵,梯度PCR儀每個孔的溫度可以在范圍內按照梯度設置,根據結果,一步就可以摸索出適反應條件。一次性PCR擴增可以設置一系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的稱之為梯度PCR儀。因為被擴增的不同的DNA片段其適合的退火溫度不同,通過設置一系列的梯度退火溫度進行擴增,從而一次性PCR擴增就可以篩選出表達量高的適合退火溫度進行有效的擴增。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴增,這樣可節省試驗時間、提高實驗效率,又節約實驗成本。是用來選擇PCR 反應適退火溫度方便、有效的方法。梯度范圍選擇在50℃~70℃范圍內,一般一次PCR 即可選擇出PCR 的適退火溫度。下面,我們來簡單介紹一下此儀器的適用范圍與使用要點。
一、適用范圍
梯度PCR儀適用于分子生物學、醫學、食品工業、司法科學、生物技術、環境科學、微生物學、臨床診斷、流行病學、遺傳學、基因芯片、基因檢測、基因克隆、基因表達等領域以聚合酶鏈式反應(PicymeraseChainReaction,PCR)為特征的、以檢測DNA/RNA為目的的各種病原體檢測及基因分析。
二、使用要點
1、建議PCR反應結束后,取出樣品,不要過夜4℃保存樣品。
2、本儀器可在 5℃-40℃的環境下使用,適環境溫度為 15℃-30℃,嚴禁在低于 5℃的環境下開機。環境濕度范圍為 20-80%。
3、該儀器后面有通風口,為保持通風口的通暢,后兩端必須離開墻壁 10-15cm,不要在儀器的周圍堆放雜物。
注:梯度PCR儀多應用于科研、教學機構。在不設置梯度的情況下亦可當做普通的PCR用。