1、定義不同

原代細胞培養：原代培養是指由體內取出組織或細胞進行的首次培養，也叫初代培養。

傳代細胞培養：傳代培養是指需要將培養物分割成小的部分，重新接種到另外的培養器皿（瓶）內，再進行培養的過程。對單層培養而言，80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段。

2、特點不同

原代細胞培養：與體內原組織在形態結構和功能活動上相似性大。由于培養的細胞剛剛從活體組織分離出來，故接近于生物體內的生活狀態。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段。同時也為以后傳代培養創造條件。

傳代細胞培養：當原代培養成功以后，隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂，一則細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制，生長速度減慢甚至停止；另一方面也會因營養物不足和代謝物積累而不利于生長或發生中毒。 

3、生存率不同

原代細胞培養：過程相對復雜，培養條件要求也高。

傳代細胞培養：一般普通培養條件下都容易生存，傳代細胞容易增殖。 

4、原理不同

原代細胞培養：將動物機體的各種組織從機體中取出，經各種酶（常用胰蛋白酶）、螯合劑（常用EDTA）或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖，這一過程稱原代培養。

傳代細胞培養：當細胞在培養瓶中長滿后就需要將其稀釋分種成多瓶，細胞才能繼續生長。這一過程就叫傳代。傳代培養可獲得大量細胞供實驗所需。傳代要在嚴格的無菌條件下進行，每一步都需要認真仔細的無菌操作。