NK-92細胞,ATCC細胞,培養技術

NK-92細胞,ATCC細胞,培養技術;NK-92懸浮細胞 在培養的過程中會聚團 有少量貼壁 但是貼壁很輕微 不需要胰酶消化只要槍頭輕輕吹打即可以從壁上下來。慧穎細胞庫引進ATCC細胞庫,狀態良好,傳代次數少,提醒各...
NK-92細胞,ATCC細胞,培養技術
一.產品簡介
1、產品名稱:NK-92
2、產品規格:25cm2培養瓶
3、培養基信息:
完全培養基:
75%α-MEM( 成分:無核糖核苷、去脫氧核糖核苷, Gbico 貨號:12561-056)+12.5%熱滅活馬血清+12.5%進口FBS+1%P/S+0.2mM 肌醇+0.02mM 葉酸+0.1mM β-Mer+100-200U/ml IL-2
4、 培養條件: 37℃,5%CO2細胞培養箱中培養
5、凍存條件:α-MEM+40% FBS+10%DMSO
二. 使用方法
1、您收到細胞后,請按照以下方法進行操作:
取出25cm2培養瓶,75%酒精擦拭培養瓶,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中靜置4-6小時或隔夜,以穩定細胞狀態。然后,用75%酒精擦拭培養瓶,拆下封口膜,收集瓶內液體于50ml離心管中,1000rpm離心5min,棄上清,用6ml完全培養基重懸,全部接種到25cm2培養瓶中,再放入37℃,5%CO2細胞培養箱中培養。如果離心后細胞量很多,可以直接1:2分瓶培養。
2、細胞傳代:
細胞生長至覆蓋培養瓶的85%及以上面積時,收集瓶內液體于15ml離心管中,1000rpm離5min,棄上清,用12ml完全培養基重懸細胞,按1:2的比例進行接種傳代,接種到25cm2培養瓶中,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中培養,2-3天更換培養液。換液的步驟同細胞 NK-92細胞,ATCC細胞,培養技術傳代步驟。
3、細胞凍存:
1)細胞生長至覆蓋培養瓶的85%及以上面積時,收集瓶內液體于15ml離心管中,1000rpm離心5min,棄上清,用適當量的凍存液(基礎培養基:FBS:DMSO=5:4:1)重懸細胞,并放置于凍存管中;
2)先將細胞凍存管放置于4℃ 0.5h,再放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃隔夜,24h后可轉入液氮中進行長期保存。
4、細胞復蘇:
1)從液氮中取出細胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2)將凍存管中的細胞移至含有5ml完全培養液的15ml離心管中,然后1000rpm/min,離心5min;
3)棄上清,沉淀細胞用6ml完全培養基重懸,接種到培養瓶中,后放入37℃,5%CO2細胞培養箱中培養;
4)第二天,換用新鮮完全培養基繼續培養。
三. 注意事項
1、培養基于4℃條件下可保存3-6個月;
2、在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作;
3、傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態;
4、如果您的實驗時間較長, 請在收到細胞后傳代時,按細胞量分種2瓶,使用其中的一瓶細胞實驗,其余的細胞先凍存起來。下次實驗需要時,再復蘇;
5、該 NK-92細胞,ATCC細胞,培養技術只可用于科研。
6、需要更多信息,請致電: !
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