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標準菌株傳代步驟

發布時間:2017-04-11瀏覽次數:2260返回列表

    標準菌株分為兩類:一類用于定期傳代(W3),一類用于實驗用(S3)。定期傳代用菌的傳代其操作步驟如下:
 
      (1)從冰箱冷藏室中取出菌種斜面后,應在室溫放置約30分鐘。
      (2)將裝有新鮮配制的培養基菌種保藏管管壁上注明菌名及接種日期,和傳代菌種一并移入潔凈工作臺,打開紫外燈照射一小時。
      (3)關閉紫外燈。點燃酒精燈,左手握住菌種斜面,將管口靠近火焰上方,右手拿接種棒后端,將接種環燒紅約30秒,隨后將接種棒金屬部分在火焰上燒灼,往返通過三次。
      (4)右手用無名指、小指及掌部夾住管塞,左手將管口在火焰上旋轉燒灼,右手再輕輕拔開管塞,將接種環伸入管內先在近壁的瓊脂斜面上靠一下,稍冷后再至菌苔上,刮取少量菌苔,隨即取出接種棒并將菌種管口移至火焰上方。 
      (5)塞上管塞,左手將菌種管放下,取營養瓊脂斜面(或改良馬丁瓊脂斜面)一支,照上述操作打開管塞,將接種環伸入管內至瓊脂斜面的底部向上劃一條直線,然后從底部向上作連續曲線劃線,一直劃到斜面頂端,使細菌接種在斜面的表面上。
      (6)取出接種環,在火焰上方將培養基管蓋上塞子,然后將接種過細菌的接種環在火焰上燒灼滅菌。
      (7)將已接種好的細菌管置30~35℃細菌培養箱培養22 ~24h,真菌管置23~28℃真菌培養箱多培養7天。
 
      當工作用菌種傳代代數小于5時,可直接用上一代工作用菌種轉接下一代工作用菌種,如:(W3)可直接轉接為(W4)。按上述程序操作,直至(W4)轉為(W5)為止,需重新接種,舊的工作菌種進行銷毀。