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價格:電議
所在地:上海
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更新時間:2011-10-25
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公司地址:上海市七莘路1890弄7號
范貞祥(先生)
上海高創化學科技有限公司,是一家專注于生命科學和生物技術領域的高科技企業,是國內代理銷售生物試劑、儀器的知名公司之一。公司本著為顧客服務、為科研服務的宗旨,為中國的專家和學者提供種類齊全的高品質產品。希美公司已與多家歐美著名生物技術公司簽訂獨家或區域代理協議,銷售的實驗儀器、消耗品、分子生化試劑、免疫試劑和細胞培養試劑等,已被廣泛應用于生命科學基礎研究、開發應用、制藥、疾病診斷與控制、人口與健康、生物技術等諸多領域。客戶遍布大學、研究所、醫院、衛生防疫、商品檢驗檢疫、制藥公司、生物技術公司和食品工業等單位。主要產品包括:英國Randox-lifesciences公司的藥物殘留ELISA試劑盒、抗體抗體蛋白;挪威Biosese公司的檢測表面活性劑、農藥殘留、毒素、PCB等相關有害物質的ELISA檢測試劑盒以及魚類蛋白和抗體;Gibco公司DMEM培養基、1640培養基、F12培養基,MEM培養基、F10培養基等;Prospec-Tany公司的細胞因子、生長因子、蛋白激酶、重組和天然蛋白、酶以及病毒抗原和抗體;美國eBioscience公司的流式細胞術產品等。
高創的宗旨是:為用戶提供“最高質量的產品” 和 “最優質的服務”。
人髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA Kit Human myelin basic protein,MBP ELISA Kit
人碳酸酐酶(CA)ELISA Kit Human carbonic anhydrase,CA ELISA Kit
人橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α )ELISA Kit Human skeletal muscle Actinin-α,sm Actinin-α ELISA Kit
人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA Kit Human Bone morphogenetic protein 7,BMP-7 ELISA Kit
人載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA Kit Human apoprotein A1,apo-A1 ELISA Kit
人載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA Kit Human apoprotein B100,apo-B100 ELISA Kit
人25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA Kit Human 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA Kit
人維生素C(VC)ELISA kit Human Vitamin C,VC ELISA Kit
人維生素B6(VB6)ELISA Kit Human Vitamin B6,VB6 ELISA Kit
人白三烯B4(LTB4) ELISA Kit Human Leukotriene B4,LT-B4 ELISA Kit
人腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA Kit Human intestinal fatty acid binding protein,iFABP ELISA Kit
人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA Kit Human oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISA Kit
人維生素D(VD)ELISA Kit Human Vitamin D,VD ELISA Kit
人維生素D(VD)(Vitamin D)酶聯免疫吸附測定試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究研究使用
預期應用
ELISA法定量測定人血清、血漿或其它相關液體中Vitamin D含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心酶標免疫分析法測定標本中維生素D水平。用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入維生素D抗原、生物素化的抗人維生素E抗體、HRP標記的親和素,經過徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的維生素D呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
試劑盒組成
1. 酶聯板:一塊(96孔)
2. 標準品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,其濃度為20 ug/mL,做系列倍比稀釋后,分別稀釋成20 ug/mL,10 ug/mL,5 ug/mL ,2.5 ug/mL,1.25 ug/mL,0.625 ug/mL,0.312 ug/mL,其原液直接作為zui高標準濃度,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ug/mL,臨用前15分鐘內配制。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A1:100稀釋。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B1:100稀釋。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
標本的采集及保存
1.血清:標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
操作步驟
各試劑在使用前平衡至室溫。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。除空白孔外,余孔分別加標準溶液或待測樣品100ul,輕輕混勻,37℃,120分鐘。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。
3. 每孔加檢測溶液A工作液 100ul,37℃,60分鐘。洗板3次,350ul/每孔,甩干。
4. 每孔加檢測溶液B工作液 100ul,37℃,60分鐘,洗板5次,甩干。
5. 依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光顯色30分鐘。
6. 依序每孔加終止溶液50ul,終止反應。用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
注:
1. 每次實驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是后加底物溶液及2NH2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。
2.為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內。
洗板方法
手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層
吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內,浸泡1-2分鐘,根據需要,重復此過程數次。
自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
特異性
本試劑盒可同時檢測重組或天然的人Vitamin D,且與其它相關蛋白無交叉反應。
計算
以標準物的濃度為橫坐標(對數坐標),OD值為縱坐標(普通坐標),在半對數坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
注意事項
1. 洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
2. 一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
3. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。
4. 如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數。
5.在配制標準品、檢測溶液工作液時,請以相應的稀釋液配制,不能混淆。
6.底物請避光保存。
檢測范圍:
0.2 ug/mL -30 ug/mL
說明
1. 在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發和污染,試劑避免受到微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導致出現錯誤的結果。
2. 小心吸取試劑并嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的 “預孵育”時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。而且,洗滌不充分將影響試驗結果。
3. 試劑盒保存:部分試劑保存于-20℃,部分試劑保存于2-8℃,具體以標簽上的標示為準。
4. 濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
5. 剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質,此為正常現象,不會對實驗結果造成任何影響。
6. 中、英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準。
7. 所有的樣品都應管理好,按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。
8. 有效期:6個月
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