溶酶體藍色熒光探針 LysoBlue

Cat number：KFS129

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For Research Use only

一、產品描述

溶酶體藍色熒光探針 LysoBlue 探針是熒光素 pH 指示探針，可以用來區分酸性細胞器，使得動態研究活細胞內溶酶體生物合成和功能成為可能。LysoView 染料是在酸性細胞器內富集，可導致其質子化。而質子化可以減少染料的側鏈上弱堿，減少熒光淬滅，使得生產的熒光強度增加。因此，LysoBlue 試劑表現出 pH 依賴性，在酸化條件下，熒光強度增加。

這些探針可以單獨或者組合使用，檢測酸化的溶酶體和細胞內溶酶體的功能改變。例如，在某些腫瘤細胞的溶酶體具有較低的 pH 值，而有的腫瘤細胞則相反。此外，一些細胞的細胞器酸化缺陷表現為囊性纖維化和其他病癥。LysoBlue 探針在此類應用上非常廣泛有意義。

探針光譜特性

二、產品包裝

三、操作說明

細胞制備與染色

取出之后，預熱試劑至室溫，再開蓋，短暫離心小瓶，使得微量 DMSO 液體沉淀瓶底。

染色探針的濃度選擇取決于不同的實驗類型。建議使用一些初始條件進行指導摸索。

1.1 用培養基或者其他緩沖液稀釋 1mM 的探針原液，建議使用濃度至少 1μM，但為了減少可能的過量，染料濃度應盡可能保證低。

注意：有實驗表明如細胞在染色后用無染料的培養基孵育，會看到熒光信號減弱以及細胞出泡現象。

1.2 對于貼壁細胞，蓋玻片爬片至合適的會合度時，添加 37 度預熱的探針染液，選擇合適細胞生長的條件， 

進行 30 分鐘~2 小時的孵育。再用新鮮培養基替換染色液。再選擇合適濾光片的熒光顯微鏡觀察細胞，如果細胞沒有呈現染色，建議增加標記物的濃度或者增加孵育的時間。

1.3 對于懸浮細胞，離心細胞，吸出上清，輕輕用 37 度預熱的含探針的染色液重懸細胞，選擇合適細胞生長的條件，進行 30 分鐘~2 小時的孵育。再以新鮮培養基離心重懸細胞。再選擇合適濾光片的熒光顯微鏡觀察細胞，如果細胞沒有呈現染色，建議增加標記物的濃度或者增加孵育的時間。