細(xì)胞核染料—活細(xì)胞綠菁 SYTO
Cat number:KFS147
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For Research Use o
一、產(chǎn)品描述
SYTO 綠色活細(xì)胞核酸染料( Ex/Em: 500/530 nm, bound to DNA)是一種具有細(xì)胞膜透性的核酸染料,其在于核酸結(jié)合之后熒光強(qiáng)度會(huì)得到顯著增強(qiáng)。SYTO 綠色活細(xì)胞核酸染料可以用于染死的或者活的真核細(xì)胞的 RNA 和 DNA,在革蘭氏細(xì)菌中同樣也適用。SYTO 綠色活細(xì)胞核酸染料具有如下重要特性:
? 細(xì)胞膜透性,可以穿過幾乎所有的細(xì)胞膜,包括哺乳動(dòng)物細(xì)胞和細(xì)菌。
? 摩爾吸光系數(shù)高,可見吸收光譜消光系數(shù)> 60,000 cm-1M - 1。
? 低的熒光背景,未與核酸結(jié)合時(shí),染料的量子產(chǎn)率通常<0.01。
? 與核酸結(jié)合之后,量子產(chǎn)率通常> 0.4。
SYTO 綠色活細(xì)胞核酸染料可以在不同的實(shí)驗(yàn)應(yīng)用中染活細(xì)胞或者固定細(xì)胞的核酸,能夠與配備了常規(guī)激光激發(fā)器或?qū)拵д彰鞴庠吹母鞣N熒光檢測設(shè)備匹配。
二、產(chǎn)品包裝
組份 |
KFS147 |
儲(chǔ)存條件 |
活細(xì)胞核酸染料 1mM in DMSO,SYTO Green |
500μL |
-20℃,避光 |
三、操作說明
細(xì)胞制備與染色
的染色探針濃度取決于不同的應(yīng)用程序類型,此處建議的初始條件是基于驗(yàn)證的特定細(xì)胞類型,具體實(shí)驗(yàn)中應(yīng)摸索加以調(diào)整。
1) 使用塑料試管稀釋 SYTO 綠色活細(xì)胞核酸染料,因?yàn)橄♂尩娜旧河锌赡軙?huì)附著在玻璃上。一般情況
下,如果希望得到的染色效果的話,所用的緩沖液中不要含有磷酸鹽成分。實(shí)驗(yàn)中配制其他所用試劑的時(shí)候,注意塑料管壁或玻璃管壁上不要?dú)埩羧ノ蹌M量清洗干凈,否則即使沒有細(xì)胞也會(huì)造成強(qiáng)的背景和非特異性染色吸附。所用染料的濃度可以參考表格 1.(注意:多種因素可能影響你的染色效果,如:培養(yǎng)基、細(xì)胞密度、細(xì)胞類型等等)
2) 真核細(xì)胞染色通常可以看到彌散性的胞漿和胞核染色,經(jīng)常可以看到致密的核內(nèi)小體。因?yàn)?/span> SYTO 綠色
活細(xì)胞核酸染料具有細(xì)胞膜滲透性,在中性 pH 環(huán)境下帶有一個(gè)凈正電荷,因此該染料也可以染色線粒
體。活酵母菌染色就是主要染線粒體。
3) SYTO 綠色活細(xì)胞核酸染料已經(jīng)有文獻(xiàn)報(bào)道可以用于 DNA 微陣列的染色質(zhì)量控制中。
表 1. 建議的染色條件.
細(xì)胞類型 |
染色濃度 |
染色條件 |
細(xì)菌 |
50 nM–20 μM |
孵育 1~30 分鐘 |
真核細(xì)胞 |
10 nM–5 μM |
孵育 10~120 分鐘 |
微陣列 |
50 nM in TE buffer |
孵育 5 分鐘,清洗,晾干。 |