中文名稱:改良Harris蘇木素染色液
規格:100ml|500ml
用途:屬于常規切片HE染色的明礬蘇木素的一種,適用于細胞核染色,尤其適用于臨床紙片染色。
注意事項:Harris蘇木素染色中leagene推薦采用該試劑。細胞核染色的選擇性和保存時間優于Harris蘇木素染色液,對細胞核染色較深,染色一般5-8分鐘,存儲太久后,使用時應過濾。
儲存條件:室溫,12個月
簡介:蘇木素為堿性天然染料,可使細胞核著色。細胞核內染色質的成分主要是DNA,在DNA雙螺旋結構中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA雙螺旋的外側帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。
操作步驟(僅供參考):
(一)石蠟切片染色
1、切片脫蠟至水
①二甲苯作用2次,每次5~10min。
②(可選)無水乙醇作用2次,每次3~5min。
③95%的乙醇3~5min
④90%的乙醇3~5min
⑤80%的乙醇3~5min
⑥自來水或蒸餾水沖洗1~3min
2、染色
①改良Harris蘇木素染色液5~8min
②自來水或蒸餾水沖洗5~10s
③(可選)1%鹽酸乙醇分化2~5s
④自來水沖洗20~30s
⑤(可選)弱堿性水返藍20~40s
⑥自來水沖洗30~60s
⑦伊紅染色3~5min
⑧自來水沖洗1~5s
3、脫水、透明、封固
①80%乙醇10~20s
②90%乙醇10~20s
③95%乙醇作用2次,每次1~2min。
④無水乙醇作用2次,每次2~3min。
⑤二甲苯透明3次,每次2~3min。
⑥中性樹脂封片。
染色結果:細胞核呈藍色;細胞質、肌纖維、膠原纖維、甲狀腺膠質等呈深淺不一的紅色;角蛋白、紅細胞等呈明亮的橙紅色。
(二)冰凍切片染色
1、乙mi-乙醇混合固定液5~10s
2、自來水沖洗2~5s
3、改良蘇木素染色液滴染1~2min(可加熱至50℃)。
4、自來水沖洗2~5s
5、(可選)1%的鹽酸乙醇分化液2~5s
6、自來水沖洗2~5s
7、(可選)弱堿性水返藍2~5s
8、自來水沖洗5~10s
9、伊紅染色液染色2~5s
10、水洗1~2s
11、80%的乙醇1~2s
12、95%的乙醇1~2s
13、無水乙醇2~5s
14、苯酚二甲苯(1:3)2~5s
15、二甲苯透明3次,每次2~5s。
16、中性樹脂封片
染色結果:細胞核呈藍色;細胞質、纖維呈紅色。
(三) 細胞染色
1、4%的多聚甲醛固定 10~20min。
2、自來水沖洗 2 次, 每次 2min。
3、蒸餾水沖洗 2 次, 每次 2min。
4、染色、脫蠟、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟,作用時間應相應縮短。
染色結果:細胞核呈藍色;細胞質、纖維呈紅色。
注意事項:
1、切片脫蠟應盡量干凈。
2、乙醇應經常換新液。
3、鹽酸乙醇分化液的分化時間應該依據切片厚薄、組織的類別和鹽酸乙醇分化液的新舊而定,另外分化后自來水沖洗時間應該足夠,以便徹底清洗酸。
4、乙mi-乙醇混合固定液是由乙mi和 95%乙醇等量混合而得,再加入適量乙酸,密閉保存。
5、冷凍切片染色時間盡量要短。
6、促藍液常使用 0.2~1%氨水水溶液或 Scoot 促藍液或 0.1~1%碳酸鋰水溶液。
7、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
