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Masson-Fontana黑色素染色液操作方法

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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱:Masson-Fontana黑色素染色液
分類:色素染色
規(guī)格:3X50ml
儲存條件:4℃,避光,3個月
用途:黑色素染色,顯示黑色素顆粒
注意事項(xiàng):主要由氨銀溶液、海波溶液、中性紅溶液等組成。黑色素、嗜銀素呈黑色,細(xì)胞核呈紅色。


簡介:
黑色素屬于非血源性內(nèi)生色素,是一組由黑色素母細(xì)胞產(chǎn)生的顏色從淺棕色到黑色的色素。這種色素通常出現(xiàn)在皮膚表皮、眼睛、大腦的黑質(zhì)和毛囊中。黑色素有一個顯著的物理性質(zhì),即完全不溶解于大多數(shù)有機(jī)溶劑——幾乎可以肯定是由于黑素體中已形成的黑色素可與蛋白質(zhì)緊密結(jié)合。黑色素另一個物理性質(zhì)是能夠被強(qiáng)氧化劑漂白,盡管這個過程是緩慢的。在病理情況下,這種色素也可出現(xiàn)在良性痣細(xì)胞瘤中和惡性黑色素瘤中。在常規(guī) HE 染色中不呈黑色而是呈棕黃色或棕黑色。許多方法可用于識別黑色素和黑色素生成細(xì)胞,如還原方法,如 Masson-Fontana 銀技術(shù)和 Schmorl 三價鐵-鐵氰化K還原實(shí)驗(yàn);酶方法(如多巴反應(yīng));熒光方法;免疫組織化學(xué)。

Masson-Fontana 黑色素染色液利用黑色素具有將銀氨溶液還原為金屬銀特性即嗜銀反應(yīng)原理來顯示黑色素,染色后黑色素呈黑色,該法屬于常用的黑色素特殊染色法,效果較其他染色理想。


組成:
Masson-Fontana 黑色素染色液由三部分組成:試劑(A)Fontana 氨銀溶液,100ml;
試劑(B)海波溶液,100ml;試劑(C)中性紅染色液,100ml。


操作步驟:
1、固定:10%中性福爾馬林是的固定液,應(yīng)當(dāng)避免使用鉻酸鹽和等固定液。
2、切片:所有類型的切片都可以處理,數(shù)值切片可能需要做一些調(diào)整。
3、將實(shí)驗(yàn)切片及對照切片入蒸餾水中。
4、入 Fontana 氨銀溶液,避光浸染 12~24h 或 56℃溫箱孵育 30~40min。
4、蒸餾水多次洗凈(5~6 次)。
5、入海波溶液處理切片 1~5min。
6、自來水處理 3~5min。
7、(可選)入中性紅染色液,輕輕復(fù)染 5min。
8、蒸餾水沖洗。
9、95%乙醇、無水乙醇脫水。
10、二甲苯透明、中性樹膠封固。


注意事項(xiàng):
1、 注意鏡下控制 Fontana 氨銀溶液的染色時間,以黑色素顆粒呈現(xiàn)黑色為宜。如果染色時間過長,脂褐素、膽色素、橙色血質(zhì)也會呈黑色,不易于黑色素區(qū)分。
2、與 Fontana 氨銀溶液接觸的器皿應(yīng)嚴(yán)格清洗,否則可能與殘余污染物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。
3、長期暴露在 56℃下的切片,可能會產(chǎn)生細(xì)小的沉著物。
4、脆弱的物質(zhì)可能要涂上一層火棉膠,避免切片從載玻片上翹起。
 
 
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