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堿性磷酸酶染色液(偶氮偶聯(lián)法)注意事項(xiàng)

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  • 更新日期:2021-09-16 14:45
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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱:堿性磷酸酶染色液(偶氮偶聯(lián)法)
產(chǎn)品分類:酶類染色
產(chǎn)品用途:用于石蠟切片、冰凍切片、骨髓細(xì)胞涂片、血液涂片等的堿性磷酸酶染色,又稱同時(shí)偶聯(lián)法
注意事項(xiàng):堿性磷酸酶活性部位呈藍(lán)色,位于胞槳中。非特異性反應(yīng)少,結(jié)果可靠。
儲(chǔ)存條件:-20℃,避光,有效期6個(gè)月
規(guī)格:4*2ml 4*10ml 4*20ml

簡(jiǎn)介:堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase,簡(jiǎn)稱ALP或AKP)為一類磷酸酯酶,廣泛分布于哺乳動(dòng)物組織內(nèi),其活性所需適PH9.2-9.8。此酶主要存在于物質(zhì)交換活躍之處(細(xì)胞膜),如腸上皮和腎近曲小管的刷狀緣、附睪上皮之靜纖毛、肝的毛細(xì)膽管膜以及微動(dòng)脈和毛細(xì)血管動(dòng)脈部之內(nèi)皮,還見(jiàn)于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基復(fù)合體、吞飲小泡、腸上皮至溶酶體、中性粒細(xì)胞之中性顆粒以及平滑肌之細(xì)胞膜。

堿性磷酸酶染色液(偶氮偶聯(lián)法)不是采用金屬沉淀法來(lái)顯示堿性磷酸酶活性,而是采用偶氮偶聯(lián)法(又稱同時(shí)偶聯(lián)法),其原理是在PH9.2-9.8的堿性條件下,細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶可使AB-BI磷酸鹽水解,釋放出磷酸和萘酚,后者與偶聯(lián)重氮鹽生成有色產(chǎn)物,定位于細(xì)胞質(zhì)中。該染液專門用于血液、骨髓或細(xì)胞涂片、冰凍切片、梯度入水后的石蠟切片等的堿性磷酸酶染色,堿性磷酸酶活性部位呈紅色,位于胞漿,結(jié)果較金屬鹽沉淀法可靠。

自備材料:
1、載玻片、濕盒
2、普通光學(xué)顯微鏡

操作步驟(僅供參考):
1、血液、骨髓或細(xì)胞涂片、冰凍切片、石蠟切片入ALP固定液固定3min(梯度入水后的石蠟切片無(wú)固定),水洗。
2、滴加配置好的ALP孵育液,放入濕盒中,避光孵育15-20min,水洗。
3、蘇木素染色液復(fù)染5-8min或甲基綠染色液復(fù)染3-5min。
4、水洗、鏡檢或甘油明膠封固后鏡檢。

臨床意義:
1、類白血病反應(yīng)積分明顯增高,未經(jīng)治療的慢性粒細(xì)胞白血病積分明顯減低。
2、急性細(xì)菌性感染積分明顯增高,病毒性感染積分多正?;驕p低。
3、再生障礙性貧血積分常增高,PNH、MDS積分常減低。

注意事項(xiàng):
1、血液或骨髓細(xì)胞涂片或其他樣本均應(yīng)新鮮,厚薄適宜,及時(shí)固定,否則會(huì)影響酶的活性。
2、ALP孵育液易失效或降低陽(yáng)性強(qiáng)度,即配即用,不宜久置。
3、復(fù)染時(shí),蘇木素染色液或甲基綠染色液二者取其一。
4、每次染色時(shí),應(yīng)有陽(yáng)性對(duì)照片。
5、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期:6個(gè)月
 
 
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