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基底膜六胺銀染色液(PASM)實驗方法

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  • 更新日期:2021-10-21 13:54
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中文名稱: 基底膜六胺銀染色液(PASM)
分類:碳水染色
規(guī)格:6×50ml
儲存條件:4℃,避光,3個月
用途:基底膜粘多糖染色,又叫PASM染色(periodic acid-silver methenamine)。
注意事項:腎小球囊基底膜、毛細血管球基底膜、網(wǎng)狀纖維和Ⅳ型膠原纖維呈黑色,背景呈綠色(用HE復(fù)染,核呈藍色,背景呈紅色)。主要由過碘酸、鐵明礬、六胺銀工作液、氯化金、淡綠等染色液組成。


產(chǎn)品說明:基底膜六胺銀(methenaminesilver)染色是一種經(jīng)典顯示基底膜的方法。組織經(jīng)過氧化,使基底膜內(nèi)的黏多糖暴露出醛基,醛基把六胺銀還原為黑色的金屬銀。氯化金可使金屬銀轉(zhuǎn)變?yōu)榉€(wěn)定的金屬金,同時使背景清晰。六胺銀染色能清晰地顯示基底膜,在腎bin變中應(yīng)用多,常用來觀察腎小球毛細血管基底膜在炎性損傷時如斷裂、增生、折疊等形態(tài)改變。

操作步驟(僅供參考):
1.切片脫蠟至水洗。
2.切片入氧化劑氧化15min。
3.自來水洗、蒸餾水洗2min。
4.入鐵明礬溶液染色10min。
5.自來水洗、蒸餾水洗2min。
6.入配制好的六胺銀工作液中,60℃水浴染色大約25~30min,切片呈煙草黃色或黑色為止。
7.入蒸餾水中清洗。
8.用氯化金溶液調(diào)色1~2min。
9.蒸餾水洗2min。
10.置于海波溶液1min。
11.自來水洗。
12.用淡綠溶液復(fù)染1min。
13.自來水洗。
14.95%乙醇開始脫水,二甲苯透明,中性樹膠封封固。

染色結(jié)果:
腎小球囊基底膜、腎毛細血管球基底膜  黑色
背景  綠色

注意事項:
1.實驗中所用玻璃器皿,應(yīng)預(yù)先放入洗液浸泡過并沖洗干凈,烤干。
2.六胺銀工作液配制后可放入溫箱中預(yù)熱3-5min(選做)。
3.配制好的六胺銀工作液是一次性的,不能久放。
4.氯化金調(diào)色時,一定要在顯微鏡下觀察。
5.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 
 
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