產品名稱:胰蛋白酶抗原修復試劑盒
規 格:2×100ml
用 途:抗原修復緩沖液
注意事項:主要由H2O2-甲醇溶液、胰蛋白酶修復液組成。
儲存條件:—20℃,12個月
簡介:組織在制作過程中,由于化學試劑的作用封閉了抗原,又由于熱的作用致使部分抗原的肽鏈發生扭曲,致使在免疫組化的染色過程中不能將其顯示出來,為了解決上述的問題,利用化學試劑和熱的作用將這些抗原重新暴露出來或修正過來的過程稱為抗原修復。檸檬酸鹽、EDTA或Tris等緩沖液在熱的條件下可以使被福爾馬林屏蔽的抗原重新暴露出來,同時又不會對抗原表位造成破壞,從而提高抗原的檢出率,降低背景染色,提高診斷的準確率。在熱誘導抗原修復法出現之前,胰蛋白酶、蛋白酶K、胃蛋白酶等酶類的誘導的表位修復是chang用的方法。
胰蛋白酶抗原修復試劑盒能暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位,從而大大改善免疫染色效果。通常石蠟切片都需進行抗原修復處理,而冰凍切片可以不進行抗原修復處理,抗原修復可以提高石蠟切片的免疫染色效果,亦可以不同程度的提高冰凍切片的染色效果。當冰凍切片免疫染色效果不理想時,可考慮進行抗原修復。按照每個片子需要10ml抗原修復液(1×)計算,100ml抗原修復液可以用于10個樣本的抗原修復。
組成:
試劑(A):胰蛋白酶溶液 100ml -20℃
試劑(B):TB漂洗液 100ml RT
使用說明書 1份
自備材料:
1、系列乙醇
2、雙蒸水或去離子水
3、加熱設備
4、免疫染色洗滌液
操作步驟(僅供參考):
(一)石蠟切片
1、脫蠟至水
①二甲苯3次,每次3~5min。
②無水乙醇脫水2次,每次3~5min。
③95%的乙醇,3~5min。
④90%的乙醇,3~5min。
⑤80%的乙醇,3~5min。
⑥70%的乙醇,3~5min。
⑦蒸餾水沖洗2次,每次3~5min。
2、抗原修復:將切片浸泡在胰蛋白酶溶液中,孵育10~25min。
3、TB漂洗液洗滌1~2次,自來水洗滌,每次3~5min,徹底漂洗干凈。
4、進行后續的免疫染色步驟。
(二)冰凍切片:
1、免疫染色洗滌液或自來水洗滌切片5min。
2、抗原修復:將切片浸泡在胰蛋白酶溶液中,孵育10~25min。
3、TB漂洗液洗滌1~2次,自來水洗滌,每次3~5min,徹底漂洗干凈。
4、進行后續的免疫染色步驟。
(三)其它樣品:其它樣品參考石蠟切片或冰凍切片進行操作。
注意事項:
1、胰蛋白酶溶液恢復至室溫后再使用,但應避免反復凍融。
2、浸泡在胰蛋白酶溶液中,佳孵育時間需根據不同的樣品和目的蛋白自行摸索。
3、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
