規格：250T/500T
分類：蛋白檢測
儲存條件：室溫,避光，12個月
用途：紫外光吸收法或呈紫外分光光度法定量檢測總蛋白含量
注意事項：優點是：操作迅速、簡便,不易受低濃度鹽類的干擾；缺點是與標準蛋白中酪氨酸、色氨酸含量差異較大的蛋白質,準確性較差。樣品中含有嘌呤、嘧啶及核酸會干擾檢測結果。
簡介：
蛋白質分子中存在含有共軛雙鍵的酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸，使蛋白質在270～波長范圍內具有吸收紫外光的性質，其中酪氨酸的大吸收峰為，色氨酸的大吸收峰為，苯丙氨酸的大吸收峰為。在上述波長范圍內，蛋白質溶液的吸收值與其濃度呈正比，可作定量測定。
紫外法蛋白定量試劑盒優點是：操作迅速、簡便，不易受低濃度鹽類的干擾；缺點是與標準蛋白中酪氨酸、色氨酸含量差異較大的蛋白質，準確性較差。樣品中含有嘌呤、嘧啶及核酸會干擾檢測結果。
自備材料：
1.分光光度計或酶標儀
2.96孔板或離心管
操作步驟：
1、用去離子水或蒸餾水稀釋蛋白稀釋液(10×，即為蛋白稀釋工作液。取蛋白標準，加入蛋白稀釋工作液，即配制成蛋白標準(1mg/ml)，-20°保存。
2、標準曲線法：取若干試管或96孔板，如下操作以分光光度法為例。光度法為例。選用石英比色皿，在280nm處以第1管作為調零點，分別檢測各管吸光度，以A280為縱坐標，以蛋白質濃度為橫坐標，繪制標準曲線。
取1ml待測蛋白加至3ml的蛋白稀釋工作液中，混勻，分光光度計或酶標儀測定A280。根據標準曲線計算出樣品的蛋白濃度。
3、Lowry-Kalckar法(又稱280nm和260nm吸收差法)：對于含有核酸的蛋白質，無需制作標準曲線。以蛋白稀釋工作液作為調零點，取待測蛋白加至蛋白稀釋工作液中，混勻，分光光度計或酶標儀測定A280和A260。根據經驗公式計算出待檢測樣品的蛋白濃度，如果蛋白濃度過高應用蛋白稀釋工作液稀釋后再行檢測。
蛋白質濃度（g/L）=1.45xA280-0.74xA280
4、Waddell法(又稱215nm和225nm吸收差法)：對于蛋白質含量較少的溶液，適用于該法。若取干試管或96孔板，如下操作以分光光度法為例。以蛋白稀釋工作液作為調零點，取1ml蛋白標準（1mg/ml）加至蛋白稀釋工作液中，混勻，分光光度計或酶標儀測定A215和A225。以215nm與225nm吸光度值之差(D=A215-A225)為縱坐標，以蛋白濃度為橫坐標，繪制標準曲線，再測出未知樣品的吸收差，即可由標準曲線查出未知樣品的蛋白質濃度。或者不用制作標準曲線，直接按照如下經驗公式計算：
蛋白質濃度（g/L）=144x（A215-A225）
注意事項：
1. 蛋白標準(BSA)粉末溶解于蛋白稀釋工作液，該液中含有防腐劑，不影響后續檢測，該蛋白標準液-20°保存。
2.待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中，蛋白標準也宜溶解于什么樣的稀釋液中，樣的稀釋液中，否則待測蛋白與蛋白標準中所含非蛋白成分不一致，有可能導致測定不準確。
3.如果沒有分光光度計，也可以使用酶標儀測定，但應考慮根據比色皿的小檢測體積。
4.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
