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白蛋白檢測試劑盒(溴甲酚紫微板法)簡介說明

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  • 更新日期:2022-01-07 16:13
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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱:白蛋白檢測試劑盒(溴甲酚紫微板法)
分類:生化檢測
規(guī)格:100T
用途:用于人或動(dòng)物血清、血漿、組織等樣本中的蛋白含量測定,該法操作簡單、方法特異,既可手工操作,又可采用自動(dòng)分析儀檢測。
注意事項(xiàng):檢測原理是在酸性環(huán)境下,白蛋白分子帶正電荷,與帶負(fù)電荷的溴甲酚紫(Bromocresolpurple,BCP)結(jié)合生成綠色復(fù)合物,在603nm處有吸收波,該復(fù)合物的吸光度與白蛋白濃度成正比,與同樣處理的白蛋白標(biāo)準(zhǔn)比較,求得待測樣品中白蛋白濃度。

簡介:
總蛋白(Total?Protein,TP)由白蛋白和球蛋白組成,檢測白蛋白的方法有雙縮脲法、色氨酸法、染料結(jié)合法。檢測白蛋白的染料結(jié)合法可采用溴甲酚綠或溴甲酚紫染料結(jié)合,上述染料對(duì)白蛋白具有高度的親和力,通常監(jiān)測染料與白蛋白結(jié)合的初速率,該速率與樣品中白蛋白濃度成正比。白蛋白檢測試劑盒(溴甲酚紫微板法)檢測原理是在酸性環(huán)境下,白蛋白分子帶正電荷,與帶負(fù)電荷的溴甲酚紫(Bromocresol?purple,BCP)結(jié)合生成綠色復(fù)合物,在603nm處有吸收波,該復(fù)合物的吸光度與白蛋白濃度成正比,與同樣處理的白蛋白標(biāo)準(zhǔn)比較,求得待測樣品中白蛋白濃度。本試劑盒多用于人或動(dòng)物血清、血漿、組織等樣本中的蛋白含量測定,該法操作簡單、方法特異,既可手工操作,又可采用自動(dòng)分析儀檢測。本試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。

自備材料:
1.離心管、小試管
2.96孔板
3.酶標(biāo)儀

操作步驟(僅供參考):

1.取白蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液或稀釋液加入到白蛋白標(biāo)準(zhǔn)中,充分溶解后配制成40mg/ml的白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液,配制后可立即使用,溶解后的白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)-20℃保存。亦可按自己試驗(yàn)要求繼續(xù)進(jìn)行稀釋,如稀釋至1mg/ml。特別提示:待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中,白蛋白標(biāo)準(zhǔn)也宜溶解于什么樣的稀釋液中。例如待測蛋白溶解于蔗糖中,亦取白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶解于蔗糖中。一般也可以用NaCl或PBS作為溶解白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋液。

2.樣本處理:血清、血漿樣本直接取檢測。對(duì)于組織樣本,組織質(zhì)量(g):生理鹽水比例,加入生理鹽水或PBS,冰浴下勻漿后,離心,取上清待檢。

3.白蛋白加樣操作,按下表依次加入試劑:
加入物(μL)                         空白孔    標(biāo)準(zhǔn)孔   待測孔
白蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液                    5        -        -
白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液(40mg/ml)            -       5        -
待檢樣品(血清、血漿、組織勻漿液)    -       -        5
BCP試劑                            250      250     250

4.先在酶標(biāo)儀處以空白管調(diào)零,逐管加入BCP試劑,并立即混勻。

5.放置(30±3)s,讀取標(biāo)準(zhǔn)孔和各待測孔的吸光度。

6.當(dāng)遇到脂血混濁,可設(shè)“樣本空白孔":取待測樣品加入白蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液,予以校正。

計(jì)算:
白蛋白(g/L)=(待測孔吸光度/標(biāo)準(zhǔn)孔吸光度)×白蛋白標(biāo)準(zhǔn)液濃度(g/L)

參考區(qū)間:健康成年人    36~46g/L

注意事項(xiàng):
1.白蛋白標(biāo)準(zhǔn)粉末溶解于白蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液后,即獲得白蛋白標(biāo)準(zhǔn)原液,該原液中含有防腐劑,不影響后續(xù)檢測,該蛋白標(biāo)準(zhǔn)原液-20℃長期保存。
2.如果沒有分光光度計(jì),也可以使用酶標(biāo)儀測定。使用酶標(biāo)儀測定蛋白濃度時(shí),每個(gè)試劑盒可以測定的樣品數(shù)量可能會(huì)顯著增加。
3.本法線性范圍是10~50g/L,在10~40g/L呈良好線性范圍。
4.CV可達(dá)0.45%,回收率可達(dá)99.3%~102%,平均回收率達(dá)100.5%。
5.該法測定正常樣本的批間變異系數(shù)為6.3%。

有效期:6個(gè)月有效。白蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制成溶液后應(yīng)-20℃凍存。
 
 
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