1,將要進行實驗的版孔進行設(shè)定好,標準品5個點,每個點設(shè)定平行,需要用到10個孔,空白只需1個孔。剩下孔可以做為樣本孔
2,稀釋標準,準備好5個EP管,然后在每個EP管中加入150微升標準稀釋液,編上編碼,分別為1,2,3,4,5,在1號管中加入150標準品,用槍頭反復吹打10次左右(注意控制幅度不要過大容易產(chǎn)生氣泡)如果有渦旋儀可以在渦旋儀上渦旋5秒左右,然后換槍頭,在1號管中取150微升加入到2號管,后面過程一次類推。等稀釋完,前面4個管中每管液體在150微升,5號管為300微升。濃度是從大到小。
3,標準、樣本、空白加樣:標準是每個濃度點2個孔(做平行),每孔加入50微升,加樣過程中注意換槍頭,樣本孔中每孔加入50微升,加樣過程中注意換槍頭,空白孔加入50微升蒸餾水。特別要說明的是,標準加樣和樣本加樣盡量控制在15分鐘內(nèi)加完,如果時間拖的太長,會導致前面孔先反應(yīng)后面孔才開始反應(yīng),這樣數(shù)值偏差過大。加完樣后蓋上封板膜,至37攝氏度孵育30分鐘.
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