人肌球蛋白輕鏈激酶ELISA 檢測試劑盒
本試劑僅供研究使用
我公司作為重點實驗室及各大院校長期供應商,品種齊全,質量保證,名廠生產。本公司品質優良,受到廣大科研工作者的一致肯定和贊許。期待您的來電。
聯系人:陳進
電話:86-021-31255783 / 31255782
手機:18201748966 /13524666654
傳真:86-021-37017959
網址:www.shfsbio.com
試驗原理:
MLCK試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知MLCK濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將MLCK和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中MLCK的濃度呈比例關系。
人肌球蛋白輕鏈激酶ELISA 檢測試劑盒試劑盒內容及其配制
試劑盒成份(2-8℃保存) 96孔配置 48孔配置 配制
96/48人份酶標板 1塊板(96T) 半塊板(48T) 即用型
塑料膜板蓋 1塊 半塊 即用型
標準品:400umol/L 1瓶(0.6ml) 1瓶(0.3ml) 按說明書進行稀稀
空白對照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml) 即用型
標準品稀釋緩沖液 1瓶(4.0ml) 1瓶(2.0ml) 即用型
生物素標記的抗MLCK抗體 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
親和鏈酶素-HRP 1瓶(8.0ml) 1瓶(4.0ml) 即用型
洗滌緩沖液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml) 按說明書進行稀釋
底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
終止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
標本稀釋液 1瓶(12ml) 1瓶(6.0ml) 即用型
自備材料
1. 蒸餾水。
2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
操作注意事項
1. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
3. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7. 底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8. 加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
人肌球蛋白輕鏈激酶ELISA 檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法
1、 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5、 保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑的準備
1. 標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:
400 umol/L (6號標準品) 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。
200 umol/L (5號標準品) 100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液
100 umol/L (4號標準品) 100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液
50 umol/L (3號標準品) 100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液
25 umol/L (2號標準品) 100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液
12.5 umol/L (1號標準品) 100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液
0 umol/L (空白對照) 原始濃度不用稀釋直接加入50ul。
2. 洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
操作步驟
1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
2. 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5. 每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8. 取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。
建議使用的實驗方案
標準品濃度(umol/L)
A 400 400 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
B 200 200 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
C 100 100 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
D 50 50 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
E 25 25 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
F 12.5 12.5 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
G 0 0 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
H 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
局限
6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果。
試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。
結 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的MLCK標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的MLCK含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3、檢測值范圍:0-400umol/L
4、敏感度: 1.0 umol/L
雞促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 Chicken follicle-stimulating hormone,FSH ELISA試劑盒
雞促黃體激素(LH)ELISA試劑盒 Chicken Luteinizing Hormone,LH ELISA試劑盒
雞γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 Chicken Interferon γ ,IFN-γ ELISA試劑盒
雞白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 Chicken Interleukin 6,IL-6 ELISA試劑盒
雞碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒 Chicken carbonic anhydrase,CA ELISA試劑盒
雞抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒 Chicken Anti-Thrombin Ⅲ,AT-Ⅲ ELISA試劑盒
雞熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒 Chicken Heat Shock Protein 20,HSP-20 ELISA試劑盒
雞熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒 Chicken Heat Shock Protein 60,HSP-60 ELISA試劑盒
雞17羥皮質類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒 Hydroxycorticosteroids,17-OHCS ELISA試劑盒
雞白介素4(IL-4)ELISA試劑盒 Chicken Interleukin 4,IL-4 ELISA試劑盒
雞白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 Chicken Interleukin 2,IL-2 ELISA試劑盒
雞一氧化氮(NO)ELISA試劑盒 Chicken nitric oxide,NO ELISA試劑盒
雞單純皰疹病毒Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)ELISA試劑盒 Chicken Herpes simplexvirus Ⅱ antibody,HSVⅡ-Ab ELISA試劑盒
雞補體3裂解產物(C3SP)ELISA試劑盒 Chicken Complement 3 split product,C3SP ELISA試劑盒
雞腎上腺髓質素(ADM)ELISA試劑盒 Chicken adrenomedullin,ADM ELISA試劑盒
雞巨噬細胞替代激活相關化學因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒 Chicken Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1,AmAC-1 ELISA試劑盒
雞免疫核糖核酸(Irna)ELISA試劑盒 Chicken Immune RNA,Irna ELISA試劑盒
雞β內酰胺酶(β-lactamase)ELISA試劑盒 Chicken β-lactamase ELISA試劑盒
雞流行性乙型腦炎抗體IgG(JE IgG)ELISA試劑盒 Chicken Japanese Encephalitis IgG,JE IgG ELISA試劑盒
雞α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA試劑盒 Chicken α-Glucosidase,a-Glu ELISA試劑盒
雞血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒 Chicken Platelet Factor 4,PF-4 ELISA試劑盒
雞腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3(TRAIL-R3)ELISA試劑盒 Chicken tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3,TRAIL-R3 ELISA試劑盒
雞L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA試劑盒 Chicken L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL ELISA試劑盒