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價(jià)格:電議
所在地:上海
型號(hào):
更新時(shí)間:2019-10-18
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公司地址:上海市楊浦區(qū)鐵嶺路32號(hào)1519-10室
霍經(jīng)理(先生) 經(jīng)理
小鼠鈣結(jié)合蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理實(shí)驗(yàn)室專用
1)代測(cè)收費(fèi)情況?幫忙處理標(biāo)本收費(fèi)嗎?
答:客戶購(gòu)買我們的試劑盒的前提下,代測(cè)是。
2)收集樣本,一般都收集哪些?
答:客戶從種屬身上提取的,包括血液,血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿,唾液等標(biāo)本,植物的,組織,葉,汁,根,糞便,牛奶等
答:標(biāo)準(zhǔn)孔是復(fù)孔:更好的檢驗(yàn)樣本接近的值,避免假陽(yáng)性。測(cè)復(fù)孔可以取兩個(gè)結(jié)果的平均值,結(jié)果更穩(wěn)定。
4)用什么儀器來(lái)檢測(cè)?
答:采用酶免儀器來(lái)檢測(cè),所有酶標(biāo)儀的標(biāo)長(zhǎng)都是450nm.
一、樣本
樣本處理原則:所有的樣本,用無(wú)菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),如果以后碰到其他的樣本,也按這個(gè),納入?yún)R總表。
1、:用無(wú)菌管收集,室溫血液自然凝固10-20分鐘,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,保存中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2、:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、肝素鈉或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,保存中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3、:用無(wú)菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
4、胸腹水:用無(wú)菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,保存中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5、腦脊液:用無(wú)菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,保存中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6、唾液:用無(wú)菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,保存中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
7、細(xì)胞上清:檢測(cè)性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,保存中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
8、牛奶:用無(wú)菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,保存中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
9、蜂蜜:用無(wú)菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,保存中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
10、全血:用含有抗凝劑的無(wú)菌管收集,立即輕輕搖動(dòng),來(lái)回輕輕顛倒數(shù)次,使血液和抗凝劑混勻,以防血液凝固。
二、固體樣本
固體樣本處理原則:稱取1g的固體樣本,用9g的緩沖液溶解,蛋白可以直接離心取上清檢測(cè),細(xì)胞內(nèi)的蛋白,要先收集細(xì)胞,再用破碎,離心取上清。
1、組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取1g組織,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清。分裝一份待檢測(cè),其余冷凍備用,保存中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。對(duì)于植物組織,不好勻漿的話,就在液氮中充分研磨;
2、細(xì)胞內(nèi)蛋白樣本
許多待測(cè)蛋白不是蛋白,而是存在于細(xì)胞內(nèi)的蛋白,這個(gè)時(shí)候,要先收集細(xì)胞,洗滌干凈,再破碎細(xì)胞,離心取上清。
(1)的細(xì)胞
A、動(dòng)物細(xì)胞:用PH7.2-7.4的PBS稀釋細(xì)胞懸液,使細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融(如果反復(fù)凍融,破碎效果不好,就采用超聲波破碎),以使細(xì)胞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,保存中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
B、植物細(xì)胞:用PH7.2-7.4的PBS稀釋細(xì)胞懸液,使細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右,置于冰盒上,用超聲破碎儀,設(shè)置破碎2s,冷卻30s的,充分破碎細(xì)胞,以使細(xì)胞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,保存中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)組織的細(xì)胞
切割標(biāo)本后,稱取1g組織,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),去除上清,再用pH7.2-7.4左右的PBS小心洗滌沉淀的細(xì)胞三遍。再用上述的細(xì)胞破碎破碎細(xì)胞。
3、土壤:稱取1g土壤,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工將標(biāo)本充分混勻。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清。分裝一份待檢測(cè),其余冷凍備用,保存中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。如果是測(cè)蛋白,直接取上清檢測(cè),細(xì)胞內(nèi)蛋白,要破碎細(xì)胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2-7.4左右的PBS,溶解咽拭子頭部,搖勻,用鑷子取出咽拭子并擠干,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清。分裝一份待檢測(cè),其余冷凍備用,保存中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。如果是測(cè)蛋白,直接取上清檢測(cè),細(xì)胞內(nèi)蛋白,要破碎細(xì)胞。
5.植物標(biāo)本中相關(guān)酶或蛋白的測(cè)定:(粗提取)
1、新鮮植物組織請(qǐng)?jiān)谝旱谐浞盅心ィ?br />
2、加入樣品體積9倍的提取液(pH?7.4?PBS緩沖液),3、?請(qǐng)于4度,8000rpm,離心30分鐘,取上清并暫時(shí)保存于4度待用。