MLV逆轉錄酶的品牌是百奧萊博，是優質的工具酶產品，本制品用于科研目的，本品質量穩定，價位合理，需要MLV逆轉錄酶等工具酶產品的客戶，請到我公司官網聯系我們。

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特別提示：包括MLV逆轉錄酶在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：MLV逆轉錄酶
英文名稱：MLV Reverse Transcriptase
產品貨號：MT0013
產品規格：10KU|50KU

MLV逆轉錄酶是我司在鼠源病毒反轉錄酶基礎上進行改良而得的第四代反轉錄酶，可耐受55℃高溫反應。相比于傳統42℃條件下反轉錄反應，采用55℃反轉錄可更好地打開RNA二級結構，從而提高復雜RNA模板的擴增性能、提高反轉錄cDNA的長度和產量，因此能更好地提高后續檢測的靈敏度。此外，MLV反轉錄酶通過定點突變去除了RNase H活性，從而避免反轉錄過程中降解RNA。同時經過突變文庫篩選，使得其熱穩定性更強。



產品組成：

組分	MT0013-10000U	MT0013-50000U
MLV逆轉錄酶(200U/μl)	50μl	250μl
10×RT Buffer	500μl	1ml×2

儲存：-20℃可保存2年。

單位定義：以poly(rA)為模板、oligo(dT)為引物，在37℃條件下，10分鐘內催化1nmol的dTTP摻入形成酸不溶性沉淀物所需要的酶量，定義為一個活性單位。

操作方法：

1．按以下組分配制反應體系：

加入物	加入量
MLV Reverse Transcriptase	0.5-1μl
10×RT Buffer	2μl
dNTP Mixture（10 mM each)	1μl
Total RNA or Poly(A) RNA	0.1-2μg
20×Oligo dT(25)&Random Primer *	1μl
RNase Inhibitor（40 U/μl)	0.5μl
RNase-Free H2O	Up to 20μl

*注：Oligo dT(25) 使用濃度為 20～50μM, 如使用Random9隨機引物可使用125μM，基因特異性引物可使用5μM。

2．在PCR 儀上按下列條件進行反轉錄反應：
  30℃——————15 min
  55℃——————30～60 min
  85℃——————10 min
  4℃

3．反轉錄所得的cDNA 可直接用于 PCR 反應或儲存于-20℃。

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貨號	名稱	規格
SV0105	BbvI限制性內切酶	1500U|300U|150U
SV0310	DraI限制性內切酶	10KU|5KU|1KU
SV0433	Hpy188III限制性內切酶	2500U|500U
SV0535	NheI限制性內切酶	5KU|5KU|1KU|500U
SV0561	NruI限制性內切酶	5KU|5KU|1KU|1KU|500U
SV0584	PciI限制性內切酶	1KU|200U
SV0639	RsaI限制性內切酶	5KU|1KU|500U

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名稱：Taq DNA聚合酶
貨號：BTN51206
規格：500U
本產品是Thermus aquaticus(水生棲熱菌)的DNA聚合酶基因在E. coli中表達而得,具有以雙鏈DNA為模板的5′→3′聚合酶活性和5′→3′外切酶活性。Taq DNA聚合酶長為832個氨基酸，分子量為94 Kd。該酶可以廣泛用于PCR，RT-PCR，加尾反應等。

產品特點：
1．耐熱DNA聚合活性，該酶在90℃以上幾乎無DNA合成，在75～80℃時延伸率約150個核苷酸，70℃時為60個核苷酸/秒，55℃時為24個核苷酸/秒。在65～68℃并有Mn2+存在時還具有逆轉錄活性。
2．熱穩定，在PCR混合物中95℃保溫40分鐘仍可保持50%的活性。
3．Mg2+離子依賴性，MgCl2濃度在2.0mM時該酶催化活性zuì高。
4．本酶無3′→5′外切活性，不具3′→5′校對功能，堿基錯配機率為2.1×10^-4。

產品組成：

成分	規格
Taq DNA聚合酶(5U/μL)	20μl
10×PCR Buffer(含Mg2+)	1ml
MgCl2，25mM	1ml
說明書	1份

儲存條件：低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：(以λDNA為模板進行PCR擴增反應為例)

1．按下列組份配制PCR反應液。

Taq DNA聚合酶(5U/μl)	0.25μl
10×PCR Buffer(含Mg2+)	5μl
MgCl2(25mM)	根據需要補加
自備dNTP(各2.5mM)	4μl
模板DNA	見下
引物1(20μM)	1μl
引物2(20μM)	1μl
滅菌蒸餾水	Up to 50μl

注：10×PCR Buffer含15mM MgCl2(在PCR體系中的終濃度為1.5mM)，是否需要補加MgCl2根據實驗決定。但一般不需要補加。
推薦50μL PCR反應體系中模板DNA推薦使用量

哺乳動物基因組DNA	0.5-1μg
酵母基因組DNA	5-500ng
細菌基因組DNA	0.5-50ng
質粒DNA	5-500pg
PCR回收片段	1-100pg

2．PCR反應條件
以λDNA為模板，擴增1kbp的DNA片段的PCR反應條件如下：

注：PCR反應條件視模板、引物等的結構條件不同而各異。在實際操作中需根據模板、目的片段的大小、堿基序列和引物的長短等具體情況，設定zuì佳的反應條件(溫度、時間等)。

注意事項：
PCR的反應液請在冰中配制，然后置于PCR反應儀上進行PCR反應。這種冷啟動法可增強PCR擴增的特異性，減少PCR過程中的非特異性反應，能得到良好的PCR結果。

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