二胺氧化酶是高品質的生化檢測試劑盒產品，由北京百奧萊博供應，本產品僅用于生物化學研究方面，本產品質量好，且具價格，深為用戶稱道，了解更多二胺氧化酶等生化檢測試劑盒產品請聯系我司咨詢訂購。

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特別提示：包括二胺氧化酶(DAO)測試盒(微量法)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：二胺氧化酶(DAO)測試盒(微量法)
產品貨號：SK044-1
產品規格：100管/48樣

測定意義:
DAO(EC1.4.3.6)廣泛存在于動物(腸粘膜、肺、肝臟、腎臟等)、植物和微生物中。催化多胺氧化為醛，其活性與核酸和蛋白合成密切相關，能夠反映腸道機械屏障的完整性和受損傷程度。

測定原理：
DAO催化尸胺產生醛和過氧化氫，外源添加過量的辣根過氧化物酶，催化過氧化氫氧化鄰聯茴香胺生成有色物質，在460nm處有特征吸收峰，通過測定該波長吸光度增加速率，計算DAO活性。

自備實驗用品及儀器：
天平、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、蒸餾水。

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貨號：HR8763
規格：100T

名稱：ROS活性氧檢測試劑盒(cellRox Green)
貨號：HR8786
規格：200T
活性氧(Reactive oxygen species,ROS)包括過氧化氫(H2O2，Hydrogen peroxide)、羥基自由基(?OH，Hydroxyl radical)、單線態氧(1O2，Singlet oxygen)、一氧化氮(NO，Nitric oxide)、超氧陰離子(?O2-，Superoxide anion)、過氧化自由基(ROO?，Peroxyl radical)、過氧羥自由基(HOO?，hydroperoxyl)及其下游產物過氧化物過氧亞硝基陰離子(ONOO-，Peroxynitrite anion)、ClO-和羥化物等，參與細胞生長增殖、發育分化、衰老和凋亡以及許多生理和病理過程。
活性氧(reactive oxygen species,ROS)的產生主要是氧化磷酸化的結果，在呼吸鏈中，在某些位點會有“泄露”的電子直接和氧氣或和其他電子受體反應，在酶或非酶作用下引發一系列反應生成不同種類的活性氧：“泄露”的電子zuì初和氧氣反應生成超氧陰離子自由基(O2·-)。超氧陰離子遇水生成H2O2，同時過氧化氫也可由氧氣在單胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)的作用下生成，生成的過氧化氫在髓過氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)的催化下與Cl-反應可生成ClO-，在鐵或銅離子的催化下發生Fenton反應生成OH·，超氧陰離子遇氮氧化物反應生成ONOO-。這些生成的高氧化活性的物質統稱為活性氧。
CellROX Green活性氧(ROS)檢測試劑盒是一種利用熒光探針CellROX Green進行活性氧檢測的試劑盒。CellROX Green本身熒光較弱，可自由透過活細胞膜進入細胞內，并被細胞內的ROS氧化，氧化產物可摻入染色體DNA中，熒光強度增大，產生明亮的綠色熒光。根據活細胞中綠色熒光的產生，可以判斷細胞ROS含量的多少和變化。用流式細胞儀或熒光顯微鏡可直接觀察，是一種快速簡便的組織或培養活細胞中ROS經典檢測方法。在激發波長488nm，發射波長520 nm附近，使用熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、熒光分光光度計、熒光酶標儀、流式細胞儀等檢測熒光，從而測定細胞內活性氧水平?？梢蕴峁┘毎蛲?、增殖、毒性、活性氧、細胞代謝、氧化應激、細胞膜流動性、膜通透性轉換孔、細胞耗氧率、細胞內pH、細胞粘附、細胞自噬等數百種檢測試劑盒產品。

儲存條件：-20℃避光保存。
有效期：六個月。

※ ※ ※ 使用前請仔細閱讀產品說明書 ※ ※ ※
使用限制：本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。
產品更新：我公司會更新或升級產品，以優化和增強其使用性能，產品說明書會進行相應的版本更新。使用產品時，請參照隨產品附帶的說明書，不要參照網上下載的說明書，可能是不同的版本。需要zuì新電子版說明書時可以在收到產品后發郵件索取。
使用安全：使用時需要合適的實驗室外套，一次性手套。避免皮膚或粘膜與試劑接觸。如果試劑不小心接觸皮膚或眼睛，應立即用水沖洗。

注意事項：
1．正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優化實驗條件，取得zuì佳實驗效果。
2．螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。
3．禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
4．樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5．zuì好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底清除殘留清潔劑。
6．實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規定程序處理。

產品特點：
● 使用方便：可用激光共聚焦顯微鏡直接觀察、熒光分光光度計、熒光酶標儀或流式細胞儀檢測；
● 背景低，靈敏度高；
●線性范圍寬，使用方便。
檢測方法：
流式細胞儀
熒光顯微鏡
激光共聚焦
樣本類型：
● 懸浮細胞
● 貼壁細胞
試劑盒以外自備儀器和試劑耗材：
儀器：
● 激光共聚焦顯微鏡或熒光分光光度計或酶標儀或流式細胞儀，激發波長488 nm，發射波長520 nm。
●離心機● 移液器●冰箱●冰盒
試劑：
● PBS緩沖液(pH7.4，實驗室常用的10mM磷酸緩沖鹽溶液phosphate buffer saline/Dμlbecco’s PBS：約含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl)
●或者HBSS(Hank"s Balanced Salt Solution；With：Calcium Magnesium Glucose；Without：Phenol Red。Components：CaCl2(anhydrous)140mg/L(1.261mM)、MgCl2-6H2O 100mg/L(0.493mM)、MgSO4-7H2O 100mg/L(0.407mM)、KCl 400mg/L (5.333mM)、KH2PO4 60mg/L(0.441mM)、NaHCO3 350mg/L(4.167mM)、NaCl 8000mg/L(137.931mM)、Na2HPO4(anhydrous)48mg/L(0.338mM)、D-Glucose 1000mg/L(5.556mM))
耗材：
●離心管● 吸頭

使用方法：
使用注意事項：
● 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體收集至管底，避免開蓋時液體灑落。
●熒光探針標記后，一定要洗凈殘余的未進入細胞內的探針，否則會導致背景較高。
●探針標記完畢并洗凈殘余探針后，可以進行激發波長的掃描和發射波長的掃描，以確認探針的標記情況是否正常。
● 盡量縮短探針標記后到測定所用的時間，以減少各種可能的誤差。
●對于藥物作用時間較短(2小時以內)的細胞，先標記探針，后用藥物刺激細胞。對于藥物作用時間較長(6小時以上)的細胞，先用活性氧陽性對照誘導劑或相應的藥物刺激細胞，后標記探針。
●陽性對照誘導劑可以按照1:1000的比例使用。例如標記好探針的細胞共1毫升，可以加入1微升的陽性對照誘導劑刺激。通常刺激后20-30分鐘內可以觀察到非常顯著的活性氧水平升高。對于不同的細胞，活性氧陽性對照的效果可能有較大的差別。如果在刺激后30分鐘內觀察不到活性氧的升高，可以適當提高活性氧陽性對照誘導劑的濃度。如果活性氧升高得過快，可以適當降低活性氧陽性對照誘導劑的濃度?！?CellROX Green在光照和空氣中易被氧化，注意避光密封保存。
●對不同的細胞和組織，應選擇合適的孵育時間和濃度，以觀察ROS的變化，很多細胞內的ROS水平較低，需要根據實際情況適當延長孵育時間。
● CellROX Green探針可以根據需要的用量分裝后凍存，避免反復凍融。
● CellROX Green不可以一次性全部稀釋后長期保存不用，稀釋后穩定性變差，有效期縮短。
●標記的條件因細胞種類而異，根據不同樣本的實際染色結果做相應調整，在每次實驗前，請先根據不同的實驗要求、細胞類型、細胞的膜通透性等進行優化，確定zuì佳條件。以下方法僅供參考。
CellROX Green探針配制：
根據需要的用量，用新鮮無血清培養基或HBSS緩沖液稀釋CellROX Green探針后充分混勻，避光保存備用。
探針使用終濃度200-1000倍稀釋。一般預實驗起始濃度按500倍即可。
CellROX Green探針標記：
1．CellROX Green溶液可在新鮮無血清培養基、HBSS緩沖鹽溶液或組織灌流液中稀釋到所需濃度，終濃度200-1000倍稀釋，以此染色液更換細胞培養基或灌流液；也可直接向無血清細胞孵育液體或灌流液中加入CellROX Green探針溶液至所需濃度。
【注】
●檢測貼壁細胞時，熒光顯微鏡檢測可以原位染色也可以消化下來后染色，流式檢測消化下來后染色。
2．依據細胞ROS含量的不同，CellROX Green終濃度可選擇在200-1000倍稀釋的范圍，孵育時間可選擇30分鐘-4小時，在37℃或室溫進行避光孵育。
3．孵育結束后，用PBS等新鮮緩沖液清洗細胞或組織。漂洗時間要短。
熒光顯微鏡觀察：
1．對貼壁生長細胞或活組織，可直接在熒光顯微鏡下觀察；對懸浮生長細胞，取25-50μl細胞懸液滴到一張顯微載玻片上，再蓋上一張蓋玻片。
2．熒光顯微鏡下觀察。
流式細胞儀分析：
1．染色并洗滌細胞后用0.5～1 ml冷PBS重懸細胞(5～10萬)。
2．采用488nm波長激發，發射波長520 nm，測定待測細胞平均熒光強度。

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