本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫學診斷大鼠 OATP1B3ELISA 檢測試劑盒使用說明書檢測原理試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被大鼠OATP1B3（OATP1B3）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌

上海極威生物科技有限公司成立于上海，經過多年的努力發展已成為專業供應各類生物科研用品的公司，長期專注于生物領域，旗下產品種類眾多，特別是ELISA試劑盒這一產品已使極威生物成為業內知名公司。上海極威秉承以產品質量為根本，以市場需求為導向，以為客戶創造價值為己任的精神，致力于發展中國的科研事業。力求為我國生物科技事業提供更好的、更專業性的技術服務和科研產品。

公司目前主營的產品有ELISA試劑盒、生化試劑、標準品、對照品、抗體、細胞株、培養基、血清、酶、金標試劑盒、實驗耗材、進口試劑及實驗外包服務等。

公司產品在很多領域得到了廣泛的應用，涉及分子生物學、細胞生物學、免疫學等各個領域。為各大高校、醫院單位及各研究機構提供優質的產品。并長期與各高校、研究機構、知名企業等建立了深厚的合作關系。

極力追求，科學權威！是上海極威永恒不變的宗旨；質量一，誠信為本！更是公司生存發展的基本原則。公司的核心價值是:以優質的產品、實惠的價格、完善的服務,為我國生物科技事業提供更好的、更專業性的技術服務和科研產品；為樹立行業的領先地位而不懈努力，為科研事業及社會創造更多價值！

公司名稱：上海極威生物科技有限公司

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本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫學診斷

大鼠 OATP1B3ELISA 檢測試劑盒

使用說明書

檢測原理

試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被大鼠OATP1B3（OATP1B3）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠OATP1B3（OATP1B3）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

大鼠 OATP1B3ELISA 檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心 10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心 30 分鐘取上清。

3. 細胞上清液：3000 轉離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心 10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

自備物品

1. 酶標儀（450nm）

2. 高精du加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

大鼠 OATP1B3ELISA 檢測試劑盒操作注意事項

1. 試劑盒保存在 2-8℃，使用前室溫平衡 60 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正常現象，水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。樣本在使用前也要在室溫平衡 60 分鐘。

2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

3. 預處理后的樣本無需稀釋，直接取 10μL 加樣即可。

4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

5. 所有液體組分使用前充分搖勻。

試劑盒組成

名稱 96 孔配置 48 孔配置 備注

微孔酶標板 12 孔×8 條 12 孔×4 條 無

標準品 0.3mL 0.3mL 無

樣本稀釋液 6mL 3mL 無

檢測抗體-HRP 10mL 5mL 無

20×洗滌緩沖液 25mL 15mL 按說明書進行稀釋底物 A 6mL 3mL 無

底物 B 6mL 3mL 無

終止液 6mL 3mL 無

封板膜 2 張 2 張 無

說明書 1 份 1 份 無

自封袋 1 個 1 個 無

注：標準品濃度依次為：12、6、3、1.5、0.75、0 ng/mL.

試劑的準備

20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按 1：20 稀釋，即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。

洗板方法

1. 手工洗板：甩盡孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置 1min 后甩盡孔內液體，在吸水紙上拍干，如此洗板 5 次。

2. 自動洗板機：每孔注入洗液 350μL，浸泡 1min，洗板 5 次。

操作步驟

1. 從室溫平衡 60min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回 4℃。

2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL；

3. 待測樣本孔先加待測樣本 10μL，再加樣本稀釋液 40μL；

4. 隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體 100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。

5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置 1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板 5 次（也可用洗板機洗板）。

6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。

7. 每孔加入終止液 50μL，15min 內，在 450nm 波長處測定各孔的OD 值。

結果判斷

繪制標準曲線：在 Excel 工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應OD 值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。

試劑盒性能

1. 準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數 R 值，大于等于0.9900。

2. 靈敏度：zui低檢測濃度小于 0.1 ng/mL。

3. 特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

4. 重復性：板內變異系數小于 10%、板間變異系數小于 15%。

5. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。

6. 有效期：6 個月

免責聲明

1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。

2. 嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。

 

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